我應該使用哪種(zhǒng)病毒載體可請?

用于生物醫學(xué)研究的常見病毒載體包括慢病毒、莫洛尼鼠白音請血病病毒(MMLV)、腺病毒和腺相關門森病毒(AAV)等,每種(zhǒng)病毒載體都(dōu)有各子厭自的優缺點。許多因素會(huì)影響到您在實驗中使用什麼(me)類型的病毒術線載體,關鍵因素包括以下幾點:病毒對(duì)靶都近細胞是否具有組織親和性(也就(jiù明購)是說(shuō)能(néng)否有效感染靶細胞)?細胞是分裂黑在的還(hái)是非分裂的?您是想把目的基因瞬廠月時(shí)轉導還(hái)是穩定轉導到宿主細胞基因組中音空?需要什麼(me)樣(yàng)的轉導效率?是否需要特定啓動子驅動靶基因表達頻道?載體應用于細胞培養還(hái)是體内實驗?宿主對(duì農道)病毒的免疫反應是否會(huì)影響您的實驗?下表列出了我少選擇病毒載體時(shí)應該考慮的事(shì)項:放子

慢病毒MMLV逆轉錄病毒腺病毒腺相關病毒
組織親和性廣泛廣泛對(duì)某些細胞無效與病毒血清型有關
是否能(néng)感染非分裂細胞?
穩定整合還(hái)是瞬轉穩定整合穩定整合瞬轉,遊離瞬轉,遊離
是否能(néng)自定義啓動子
主要用途細胞培養和動物體内細胞培養和動物體内動物體内動物體内
體内免疫應答非常低
慢病毒

慢病毒是一種(zhǒng)逆轉錄病毒。一旦感染細胞,病毒的RNA基因組被(b兒笑èi)逆轉錄成(chéng)DNA,然後(hò化笑u)被(bèi)永久整合到宿主基因組中,從而飛舞允許病毒載體上攜帶的基因長(cháng)期穩定表達。慢病毒電線是最常用的基因傳遞病毒系統,因爲它是一種(zhǒng)校一能(néng)將(jiāng)基因高效永久導入哺乳動物細胞的載體。該系統對鄉遠(duì)處于分裂期和非分裂期的細胞都(開睡dōu)具有廣泛的親和性(也就(j間東iù)是說(shuō)它可以感染多種(zh那志ǒng)類型細胞),且具有相對校頻(duì)低的細胞毒性或免疫反應。慢樹快病毒可以産生較高的病毒滴度(>10TU/ml),在最佳條件下,對(duì)體外培養細胞的轉導厭放效率可接近100%。雖然慢病毒主要應用于體外轉導細胞培養,但商雜它也可用于體内動物實驗。

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MMLV逆轉錄病毒

MMLV是一種(zhǒng)類似慢病毒的逆轉錄病銀生毒,也具有廣泛的親和性并可以穩定整合間會到宿主基因組中,從而允許基因的穩開拍定表達。然而,MMLV不能(néng西懂)有效地感染非分裂細胞,并且會(hu數月ì)産生比慢病毒更顯著的細胞免疫反應。此要他外,MMLV和類似的逆轉錄病毒的病毒滴度通常僅爲慢病毒的約十風頻分之一。MMLV載體的另一個主要缺點是不能(néng)自空影主選擇用于驅動靶基因(GOI)表達的啓動子,而是由病麗好毒5’ LTR來驅動目的基因的表達。相反,慢病毒農都、腺病毒和AAV都(dōu)允許選擇自定義啓動子驅動GO視姐I表達。基于以上原因,MMLV的使用已經(jīng)減少,并逐你要漸被(bèi)慢病毒替代。然而,由于村數曆史和某些技術原因,MMLV仍然用于一些應用,如iPS少秒細胞。

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腺病毒

當腺病毒感染細胞時(shí),其基因組并不整合到宿主基因組中,而是在感染細去放胞内保持遊離狀态。由腺病毒載體攜帶的基因表達通常是短暫的,特别是在人舞快速分裂的細胞中。許多細胞類型(分裂的和非分裂)都(dōu)可以用腺事靜病毒轉導,但某些細胞由于缺乏适當的細胞表面(miàn)受店民體,因此不能(néng)被(bèi)有效轉見友導。腺病毒感染引起(qǐ)的細胞和體内免疫應答可能(néng)是顯著(zhe件學)的,并且可能(néng)幹擾某些實驗。腺病毒可以産生很高的樂的病毒滴度(>1010 TU/ml),這(zhè)有利于高效地轉導易感性靶細胞。腺病毒主要用于體吃雨内基因傳遞,如基因治療和疫苗接種(zhǒ北銀ng)。

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腺相關病毒(AAV)

AAV是另一種(zhǒng)通常用于唱麗産生瞬時(shí)基因表達的非整合遊窗姐離型病毒。與腺病毒不同,AAV具快光有非常低的免疫原性,在體内幾乎完全是非緻病性的,且在大多數情況下可以在生物安全作用1級(BSL1)的實驗室中進(jìn)行操作。AAV可以感染靜電分裂的和非分裂的細胞。當使用VectorB習路uilder的AAV載體包裝病毒時(shí),可以通過(guò)是聽使用不同的衣殼蛋白進(jìn)行病毒包裝能(néng)夠賦予病毒不同的血清鐵計型。不同血清型的病毒具有不同的組織親和性,因此當試圖感染特定組織類型時(sh場服í)應當注意選擇合适的血清型。大多數AAV樣作服(yàng)品具有相當高的滴度,使其成(現就chéng)爲高效的基因傳遞系統。AAV什他是許多動物研究的理想病毒載體系統。不資

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參考文獻
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