腺病毒載體(Adenovirus我這)能(néng)夠攜帶大片段外源DNA、男要感染分裂細胞和非分裂細胞、誘導體液和媽樂細胞免疫應答(這(zhè)對(duì紅弟)于疫苗開(kāi)發(fā)短頻是有益的)、表現出高效率的轉導和高水平的轉基因表達、不整合細資工胞DNA(在細胞内保持dsDNA遊離體)。這(zhè)些特性使間相腺病毒作爲用于基因治療的轉基因載體、疫苗載體和溶瘤病毒療法中使用的載體。我們開土日(kāi)發(fā)出一系列專有技術和試劑,從病毒滴吧照度、純度、活性以及一緻性等方面(miàn)顯著提升了腺病毒包裝工藝水平。
訂購信息
生産規格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格(CNY) | 周期 |
腺病毒⼩量制備 | >2.5x109 IFU | >1010 IFU/ml | 10x25 ul | ¥4,680.00 | 28-35天 |
腺病毒中量制備 | >1010 IFU | >1010 IFU/ml | 10x100 ul | ¥7,780.00 |
腺病毒大量制備 | >1011 IFU | >1011 IFU/ml | 10x100 ul | ¥11,880.00 |
超純化腺病毒中量制備 | >5x1011 VP | >1012 VP/ml | 10x50 ul | ¥14,680.00 |
超純化腺病毒⼤量制備 | >1012 VP | >1012 VP/ml | 10x100 ul | ¥17,580.00 |
生産規格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格(CNY) | 周期 |
腺病毒⼩量制備 | >2.5x109 IFU | >1010 IFU/ml | 10x25 ul | ¥7,780.00 | 35-42天 |
腺病毒中量制備 | >1010 IFU | >1010 IFU/ml | 10x100 ul | ¥11,880.00 |
腺病毒大量制備 | >1011 IFU | >1011 IFU/ml | 10x100 ul | ¥17,880.00 |
超純化腺病毒中量制備 | >5x1011 VP | >1012 VP/ml | 10x50 ul | ¥22,080.00 |
超純化腺病毒⼤量制備 | >1012 VP | >1012 VP/ml | 10x100 ul | ¥26,380.00 |
生産規格 | 應用 | 最小滴度 | 分裝 | 價格 (CNY) | 周期 |
---|
超純化病毒大量制備 | 細胞培養和體内應用 | >1011 VP/ml | 10x100 ul | ¥ 34,980 | 44-62天 |
定制病毒,按照定制規格交付
對(duì)照病毒,按照定制病毒的規格對(duì視靜)應選購
- 超純化病毒大量制備: >1011 VP/ml 10×100 ul
服務詳情
服務類型
我們提供第一代腺病毒(E1/E3-deleted A嗎資d5)、嵌合型腺病毒(Chimeric adenoviru森鄉s)、以及Gutless腺病毒包裝服務。Ad5病毒的感染是通過(guò雨唱)病毒顆粒表面(miàn)的纖突(Fi們答ber)與細胞表面(miàn)受體CAR(Coxsac湖近kie virus and adenovi又著rus receptor)下子特異性結合而介導的。 并不是所有細胞都用人(dōu)高表達CAR,Ad5病毒在某些不表達或者低表達黑弟CAR的細胞種(zhǒng)類上的應用受限。我們開(kāi)發(fā)了嵌合書體型腺病毒,它的感染是通過(guò北離)嵌合型纖突(Chimeric得業 fiber)與細胞表面(miàn)分子CD46特河靜異性結合而介導的。
交付内容
| 非純化腺病毒制備服務 | 純化腺病毒制備服務 |
交付内容 | 定制病毒,按照規格交付: - ⼩量制備:>1010IFU/ml,10x25 ul
- 中量制備:>1010IFU/ml,10x100 ul
- ⼤量制備:>1011IFU/ml,10x100 ul
| 定制病毒,按照規格交付: - ⼤量制備:>1012VP/ml,10x100 ul
|
對(duì)照病毒,按照定制病毒的規格對(duì)應贈送: - ⼩量制備:>1010IFU/ml,100 ul
- 中量制備:>1010IFU/ml,2x100 ul
- ⼤量制備:>1010IFU/ml,2x100 ul師人
| 對(duì)照病毒,按照定制病毒刀笑的規格對(duì)應選購: - ⼤量制備:>1012VP/ml,10x100 ul
|
輔助病毒,按照定制病毒的規格對(duì)應選購: - ⼩量制備:>1010IFU/ml,10x25 ul
- 中量制備:>1010IFU/ml,10x100 ul
- ⼤量制備:>1011IFU/ml,10x100 ul
| 輔助病毒,按照定制病毒的規格對(duì)應選購: - ⼤量制備:>1012VP/ml,10x100 ul
|
病毒重懸液 | HBSS緩沖液 | GTS緩沖液 |
運輸/存儲 | 幹冰/-80°C,避免反複凍融 | 幹冰/-80°C,避免反複凍融 |
推薦應用 | 體外培養細胞轉導 | 動物體内細胞轉導 |
對(duì)照病毒
爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您農舞的實驗,我們按照“對(duì)照病毒與定風要制病毒的生物學(xué)應用相匹下醫配”的原則給您贈送或者推薦對(duì)照病毒。公又例如,如果定制病毒表達一個基因,則推薦的對(duì)照病毒表達熒光蛋白EG了新FP。如果定制病毒表達打靶某個基因的shRNA,則對(duì)照病電女毒表達一個Scramble shRNA。推薦的對(duì)照病毒信息如鄉個下表所示:
對(duì)照病毒 | 對(duì)照載體名稱 | 對(duì)照載體ID | 定制病毒 |
EGFP對(duì)照腺病毒,CM地錢V啓動子 | pAV[Exp]-CMV>EGFP綠器 | VB010000-9299hac | 哺乳動物基因表達腺病毒(包含F作煙LEX條件性表達)、哺乳動物腺病毒CRISPR系統、站門哺乳動物非編碼RNA表達腺病毒 |
EGFP對(duì)照腺病毒,EF1A啓動子(選購) | pAV[Exp]-EF1A>EGFP | VB900088-2235wrm |
mCherry對(duì)照腺病毒,CM可嗎V啓動子(選購) | pAV[Exp]-CMV>mC紙妹herry | VB010000-9300kfr |
mCherry對(duì)照腺病毒,EF1A啓動子(選購)畫唱 | pAV[Exp]-EF1A>mCherry | VB010000-9408agb |
Scramble shRNA對(duì)照腺病毒,EGFP熒光 | pAV[shRNA]-EGFP-U6>S中信cramble_shRNA | VB010000-0020ytx又西 | 哺乳動物shRNA幹擾腺病毒 |
Scramble shRNA對(duì)照腺病毒,m裡行Cherry熒光 | pAV[shRNA]-CMV>mCherry少她-U6>Scramble_shRNA | VB010000-0021kwc |
Scramble miR30-shRNA對(duì)照是物腺病毒,EGFP熒光 | pAV[miR30]-CMV>EGFP:Scramble_miR30劇河-shRNA:WPRE | VB010000-9350dnk | 哺乳動物miR30-shRNA幹擾腺病毒中短 |
FLEX-EGFP對(duì)照腺病毒(選購) | pAV[FLEX_on]-CMV務視>rev(EGFP) | VB010000-9327vmy | 哺乳動物基因FLEX條件性表達腺病毒 |
輔助病毒
爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗,我們按照“輔助病毒與近務定制病毒的生物學(xué)應用相匹配”的原則給您推薦輔助病毒。例如,如果定制化唱月的病毒是一個gRNA腺病毒(隻表達gRNA),則需要一個表達Cas9的輔助北內病毒,才能(néng)進(jìn)舊鄉行CRISPR編輯實驗。推薦的輔助病毒信息如下表所示:
輔助病毒 | 輔助載體名稱 | 輔助載體ID | 定制病毒 |
Cas9 腺病毒(選購) | pAV[Exp]-CMV>hCas9 | VB010000-9381pwj | 哺乳動物gRNA 腺病毒(不含Cas9) |
Cre腺病毒(選購) | pAV[Exp]-CMV>Cre | VB010000-9374azh | 哺乳動物基因FLEX條件性表達腺病毒 |
運輸/儲存
我們的非純化腺病毒存儲于HBSS緩沖液,純化腺病毒存儲于GTS緩民城沖液中,并采用幹冰運輸。收到腺病毒後(h房見òu),立即放置于-80°C,可保存約一年。若放置于-20&d問離eg;C,則可保存2-3周。融解後(hòu)的腺病毒可在4°C保友為存1-2周。雖然腺病毒比其他多數病毒穩定(如慢病毒),但是也請避免反房花複凍融,因爲這(zhè)會(huì)導緻腺病毒滴度顯著下降。
生産/質控
步驟 | 描述 | 時(shí)間 |
Plasmid linearization and Transfectio數劇n | 我們常規使用的第一代腺病毒包裝系統包括1個含有缺失了E1/E3基因的你為腺病毒基因組序列的轉移質粒(Tra場她nsfer plasmid)和1個表達視公E1基因的包裝細胞(adenovir少如al E1-expressin問鐵g cell line),其包裝流程是通過(guò)内切酶PacI將(jiān山會g)攜帶目的基因(Gene of Interest,簡稱GOI)的轉移質麗司粒線性化。線性化的質粒DNA随後(hòu)轉說劇染到包裝細胞中,E1基因的表達産物激活轉移質粒上的腺病毒基因的表家拿達(E3基因的缺失不影響腺病毒她生的包裝),産生重組腺病毒顆粒。此時(shí)生産出來的爲粗制的腺病毒。 | 第1-6天 |
Virus amplification | 粗制的腺病毒再次轉導到在包裝細胞中進朋事(jìn)行擴增。 | 第7天 |
Concentration and puri土黃fication | 對(duì)于非純化的腺病毒,腺病毒可以被(bèi)細家頻胞直接分泌到培養基中,然後(hòu)進(jì很街n)行收集。對(duì)于超純化腺病毒可錢,則還(hái)需要進(jìn)一步的南長氯化铯(CsCl)密度梯度離心進(jìn)一步純化和濃年要縮。 | 第24天 |
Quality Control | 對(duì)于每一個我們生産的腺病毒,質量控制均包括基于免疫細胞化學(業紙xué)染色(ICC)的滴度測定(Titer de些作termination)、微生物(細菌和真菌)檢測(Bi但風oburden test)和支原體檢測(Mycoplasma test)。 若轉移載體同時(shí)編碼一個熒光蛋白,我們還(hái見山)會(huì)將(jiāng)病毒進(jìn)行細胞轉導以店輛測定相應的熒光表達情況(Transduction test)。此外,對靜笑(duì)于超純化腺病毒,我們還(hái)可以檢場短測内毒素水平(Endotoxin test)。 | 第28天及以後(hòu) |
滴度保證
我們的滴度保證僅适用于包裝進(jìn)病毒的區域(從5’ ITR 地飛到3’ ITR)小于腺病毒承載限度(38.7 kb,~野生型H白鄉Ad5基因組長(cháng)度36 kb的108%)的載體。超過(g數資uò)該範圍,超出的那部分序列在包入衣殼時(shí)亮花會(huì)被(bèi)剪切掉,男錢導緻包裝出來的腺病毒顆粒含有不完整的genome。此外,對(duì)房懂于如下載體,我們同樣(yàng)不能(n這國éng)保證滴度:
- 包含對(duì)包裝過(guò)程有不利影響的序列,例如毒性基因(如促凋亡相吃基因);破壞包裝細胞或病毒的完整性(如導緻細胞聚集的膜蛋白)明頻的基因 ;易于重排或者産生二級睡不結構的序列(如重複序列或者高GC含量序列)事你。
- ⽤戶提供的載體,因爲我們無法控制載體畫微質量。
客戶提供載體
如需客戶提供慢病毒載體,則請按照外來物品接收指南將(jiāng)載體寄送給我們。請嚴格按照我們的雨討指南來進(jìn)行裝運以免造成(chéng)物品的任何延誤和損壞。客戶好厭提供的所有材料均需經(jīng)過(guò)QC檢測,每一份材料附加樂音檢測費用。請注意,客戶提供物品接收并通過(guò)QC之後(hòu)生産才正式就就開(kāi)始。
交付周期
周期是指訂單接受到發(fā)貨之間的時(shí)間。不包括需要客戶提供任何物料空畫(如病毒載體)的等待時(shí)間。
視頻
暫無
文檔
使用說(shuō)明書
腺病毒體外應用
腺病毒體内應用
COA
常見問題解答
| 慢病毒 | MMLV | 腺病毒 | AAV |
組織嗜性 | 廣泛 | 廣泛 | hAd5隻感染表達CAR受體的細胞 | 取決于血清型 |
是否可感染非分裂細胞 | 是 | 否 | 是 | 是 |
病毒基因組穩定整合抑或遊離于宿主基因組 | 穩定整合 | 穩定整合 | 遊離的DNA附加體形式 | 遊離的DNA附加體形式 |
自定義啓動子 | 是 | 否 | 是 | 是 |
應用 | 細胞培養和體内實驗 | 細胞培養和體内實驗 | 體内實驗 | 體内實驗 |
體内免疫反應 | 低 | 低 | 高 | 非常低 |
對(duì)于腺病毒,我們測量的是功效滴度(Functional 秒業titer)。在293A細胞中轉導梯度稀釋的腺病毒後(hòu),可女我們使用我們采用基于免疫化學(xué)的方法對件的(duì)轉導成(chéng)功的細胞進(jìn)行計美舊數來代表病毒滴度。這(zhè)些細胞包含了腺病毒特異性六連體數嗎蛋白(Ad5 hexon prote吧坐in),并且每個細胞被(bèi)看作一個感染單位。細胞在南都非常低的感染複數的條件下被(bèi)轉導,以保證光務每個細胞隻被(bèi)一個腺病毒感染。這(zhè)種(zhǒng)實驗方法空還與傳統的噬菌斑試驗有良好(hǎo)的相關性現窗。對(duì)于超純化的腺病毒,我們通過(guò)測定病毒顆子們粒的光密度(OD260)來換算爲滴度(光密度與病妹暗毒的功效滴度有良好(hǎo)的上城相關性)。
相關服務