病毒載體可以直接轉染細胞嗎？

使用病毒載體直接轉染細胞（而不是用活病毒志文）可以促進(jìn)靶基因（GO照員I）的表達，但是會(huì)存在一些問題（見下文）。工我因此，我們建議將(jiāng)病毒載體包裝些山成(chéng)病毒使用，而不是直接轉導細胞。

病毒轉導通常可以比質粒轉染能(néng)更有效地將月好(jiāng)DNA傳遞到靶細胞中。當使用逆弟購轉錄病毒如慢病毒或MMLV時(shí)，病做房毒基因組可以整合到宿主細胞基因組，使得攜帶在病毒上的基因可以穩定表又相達。相反，轉染的載體質粒DNA僅在細胞中瞬時生飛(shí)表達。與低MOI病毒轉導相比，質粒的直接轉染通常會(匠煙huì)使細胞中DNA的拷貝數非常高，以緻載體上攜帶的基因高水平表達。然而民身，這(zhè)種(zhǒng)方式會雜是非常不均一的（一些細胞包含許多拷貝舞技，而一些細胞隻有很少或沒(méi)有）。老南

我們的慢病毒載體5' LTR内含有強的RSV啓動子，該啓動子可用于在病毒包裝也車過(guò)程中驅動病毒RNA基因組的轉錄。使用包裝好(h嗎相ǎo)的慢病毒轉導細胞後(hòu)，5' LTR秒煙的啓動子活性失活，因此它不會(huì)影響兩(liǎng)妹畫個LTR之間靶基因（GOI）的表達。然而，如果病他厭毒載體直接轉染細胞，5' LTR啓動子將(jiāng)保持活性，這(zh喝湖è)可能(néng)會(huì)導緻許多不良效應，包括激活、議樂扭曲或抑制慢病毒載體中下遊基因的表她地達。

另外，由于病毒生産必需元件的存在，病毒載體大小商件通常大于包含相同表達盒的常規質粒。随劇遠著(zhe)質粒大小的增加，D日樹NA制備和質粒轉染的效率都(dōu)會(huì)下降。當直接進(jìn廠為)行質粒轉染時(shí)，可能(néng)會(huì)導緻轉染效率對可變得非常低下，特别是大于30 kb的腺病毒也愛載體。

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