IVT mRNA和LNP制備

雲舟生物爲體外轉錄的mRNA（IVT mRNA）和納米脂質顆粒（LN制如P）療法開(kāi)發(fā)提供全範圍的科白CRO和CDMO服務。基于我們革命性的載體設計平台和豐富的載體設計經(jī低朋ng)驗，我們可以針對(duì)體外轉錄載體設計、大規購做模IVT mRNA制備以及LNP封裝提供工藝優化校近，并爲您的科研和臨床需求量身定制合适的質量控制方案。我資樹們提供多個等級的IVT mRNA，可地雨以覆蓋從藥物開(kāi)發(fā)到臨床前研究的各種(zhǒn一弟g)下遊領域應用。

IVT mRNA的生産流程

我們可提供的IVT mRNA等級

  • 科研級别mRNA

    科研級别mRNA适用于基礎研究及藥物發(fā)現研究。此級别mR也個NA在标準的實驗室環境下生産，通過(guò)嚴謹的質量控制會照流程确保客戶獲得高質量的mRNA，以符合各類下遊研究的應用月嗎。

  • GMP-like mRNA

    GMP-like mRNA适用相訊于臨床前研究階段，如在動物體内測試藥物安全性和代謝的研票分究。此級别mRNA基本按GMP指南關鍵要求進(jìn)行生産，生産工藝和質量明鐘标準要求均相當，也是在獨立受控的生産設施單元内生産，生産過(guò)程信息有詳多來細規範的記錄，确保可追溯。GMP-like級别可看作但火是小規模GMP産品的模拟生産，由此價格相較GMP更低，周期也更短。在适當情一刀況下，GMP-like mRNA可以在無抗生素、無動物源海化、無RNA酶的體系下進(jìn)行生産和純化。每批産品懂謝放行都(dōu)會(huì)提供COA。TS很行E/BSE聲明如需亦可提供。

  • GMP級别mRNA（即將(jiāng)投産）就亮

    GMP級别mRNA制備要求在經(jīng)驗證符合GMP要求的生産車間内進(j上化ìn)行生産。整個生産過(guò)家吃程嚴格按全方位的質量保證體系來管控執火長行。通過(guò)全面(miàn)的過(guò)程及放行Q如農C檢測來确保mRNA可以達到乃至東綠超出應符合的質量及安全性要求。産品放行時(sh火做í)，我們會(huì)提供完整記錄生産請謝流程的批放行記錄。每批産品放行得答都(dōu)會(huì)提供COA。其他特定記錄如需亦可視報提供。

不同等級的IVT mRNA對(duì)比

科研級别GMP-like
應用基礎研究應用、新藥開(kāi)發(fā)、臨床前器店研究等臨床前研究，比如在動物體内的藥物安全性測試和代謝測試
規格mRNA: 0.1-10 mg草白
LNP: 0.1-3 mg		mRNA: 0.01-1 g
LNP: 3-20 mg
周期49-71天
‧ 載體設計和克隆：26-36天
‧ 質粒生産和線性化：14-21天
‧ IVT mRNA生産：14-21天
‧ LNP封裝：9-14天		59-90天
‧ 載體設計和克隆：31-41天
‧ 質粒生産和線性化：14-28天
‧ IVT mRNA生産：14-28天
‧ LNP封裝：14-21天
質量規範體系ISO9001适用于GMP體系的ISO9001
生産設施在共享的實驗室區域中并行生産在分離的單元中生産
文件控制和可追溯性否是
QC項目與放行标準QC（見下表）根據每個項目的具體需求執行
無菌灌裝N/A按需提供
保留樣(yàng)本按需提供按需提供
額外交付内容COA1. COA
2. 生産概況
3. TSE/BSE聲明（按需提供）

LNP封裝

雲舟生物擁有完整的設施支持LNP體系混合、生産、以及全林金方位的質量檢驗。我們的生産單元已入駐用于自定義LNP睡厭配方、微流控混合、稀釋、buffer交換、無菌制笑過(guò)濾和灌裝等先進(jì刀化n)設備。

圖1雲舟生物LNP封裝的mRNA檢驗。（A）粒徑通過(guò)動态光愛鐘散射（DLS）測定。該方法可以測量粒子運中務動帶來的散射光強度的波動變化。多分北學散指數（PDI）反映的則是樣(yàng)本中的區個粒子尺寸的異質性。（B）Zeta電勢反映了LNP的穩定性。樣司城(yàng)本中的Zeta電勢範圍在-1.872到+1.872 m山區V之間。。

質量控制檢驗

終産品/中間産物性質分析方法
IVT DNA 模版濃度分光光度法
DNA序列凝膠電泳、Sanger測序
線性化毛細管電泳
完整性變性膠電泳
殘留宿主E. coli DNAqPCR
mRNA濃度UV-Vis分光光度法
mRNA序列毛細管電泳、反轉錄并進(jìn)行Sanger測序
加帽效率LC-MS
Poly(A)尾巴完整性LC-MS
殘留蛋白NanoOrange染色
殘留質粒DNAqPCR
dsRNA斑點雜交
内毒素動态顯色法（KCA）
LNP内毒素動态顯色法（KCA）
封裝效率RiboGreen染色
粒徑、PDI以及Zeta電勢Zetasizer

更多服務

雲舟生物可提供用于CRISPR基因編輯的IVT Cas9 mRNA空錯和sgRNA，以及自擴增mRNA（來物saRNA）。我們可使用不同的LNP配方封裝IVT mRNA、siRN有報A、以及質粒DNA以實現多樣(湖術yàng)的基因遞送方式。