科研級載體與病毒服務
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進(jìn)一步了解 >> 我們的質量體系通過(guò)ISO 9001認證。這(zhè)些産品是在我們電兵先進(jìn)的設施中嚴格控制下生成(chéng)的。

腺相關病毒

重組腺相關病毒（AAV）是一種(zhǒng)在體外或體内實驗中均被(b笑鐘èi)廣泛使用的病毒載體。AAV可以轉廠個導大量類型的哺乳動物細胞，并且在人體中表現爲無緻病性和低免疫原性，這(就兒zhè)些特點使其成(chéng)爲當前應用于基因治療領域中其市日中一種(zhǒng)最高效的基因遞送載體玩請。雲舟生物提供高質量的AAV病毒包裝服務，可紅的以滿足AAV基因治療相關的實驗需求。我們開(k她哥āi)發(fā)出一系列專有技術，秒這從病毒滴度、純度、活性以及一緻性等方面(miàn)顯著提朋中升了AAV病毒包裝工藝水平，特别是經(jīng)懂地由我們設計的AAV載體。我們的AAV病毒具有良都都好(hǎo)的客戶評價。我們除了可以提供科研級的AAV病毒包裝服務外，還(hái)可以提供用于臨床購多應用的GMP級别AAV制備服務。

訂購信息
ssAAV
scAAV
昆蟲杆狀病毒生産AAV
科研級Plus AAV

科研級AAV病毒包裝

我們的科研級AAV病毒包裝服務可以滿足多樣(yàng)的AAV票件基因遞送實驗需求。您可以選擇三質小司粒轉染法包裝AAV或者使用昆蟲杆狀病毒我畫生産AAV。

生産規格應用最小滴度分裝價格（CNY）周期
ssAAV病毒⼩量制備細胞培養> 2x1011 GC/ml10x25 ul￥3,180.006-12天
ssAAV病毒中量制備10x100 ul￥4,680.00
ssAAV病毒大量制備> 2x1012 GC/ml10x100 ul￥7,780.00
超純化ssAAV病毒⼩量制備細胞培養和體内應用> 1013 GC/ml4x25 ul￥9,780.007-14天
超純化ssAAV病毒中量制備10x50 ul￥13,980.00
超純化ssAAV病毒⼤量制備10x100 ul￥19,980.00
超純化ssAAV病毒超⼤量制備10x500 ul￥69,280.00起(qǐ)23-33 天
超純化ssAAV病毒特⼤量制備10x1 ml￥111,280.00起(qǐ)40-50 天
其它規格請咨詢
提示：
1. GC = Genome copi國那es。
2. AAV血清型3、4的滴度通那地常偏低。對(duì)于這(zhè)些血清型我們保證其北老滴度是其它血清型最小滴度的50%。
3. 對(duì)于超純化AAV病毒，病毒顆粒經(j了銀īng)過(guò)CsCl梯度密度離報地心純化。

科研級AAV病毒包裝

我們的科研級AAV病毒包裝服務可以滿足很火多樣(yàng)的AAV基因遞送實驗需求。您可以選擇三照村質粒轉染法包裝AAV或者使用昆蟲杆狀病毒生産AA問日V。

生産規格應用最小滴度分裝價格（CNY）周期
scAAV病毒⼩量制備細胞培養> 2x1011 GC/ml10x25 ul￥3,180.006-12天
scAAV病毒中量制備10x100 ul￥4,680.00
scAAV病毒大量制備> 2x1012 GC/ml10x100 ul￥7,780.00
超純化scAAV病毒⼩量制備細胞培養和體内應用> 1013 GC/ml4x25 ul￥9,780.007-14天
超純化scAAV病毒中量制備10x50 ul￥13,980.00
超純化scAAV病毒⼤量制備10x100 ul￥19,980.00
超純化scAAV病毒超⼤量制備10x500 ul￥69,280.00起(qǐ)23-33 天
超純化scAAV病毒特⼤量制備10x1 ml￥111,280.00起(qǐ)40-50 天
其它規格請咨詢
提示：
1. GC = Genome copi見人es。
2. AAV血清型3、4的滴度通常偏低。對(duì線呢)于這(zhè)些血清型我們保證其滴度是其它血清型最小滴度的50%。
3. 對(duì)于超純化AAV病毒外小，病毒顆粒經(jīng)過(guò)CsCl梯度密度離心純化。學醫

科研級AAV病毒包裝

我們的科研級AAV病毒包裝服務可花低以滿足多樣(yàng)的AAV基因遞送實驗需求。您器藍可以選擇三質粒轉染法包裝AAV或者使用昆蟲杆狀病毒生産AAV。

生産規格應用最小滴度分裝價格（CNY）周期
超純化AAV病毒⼩量制備細胞培養與體内應用>5x1013 GC/ml10x100 ul￥39,200.0035-49天
超純化AAV病毒中量制備>5x1013 GC/ml25x200 ul￥141,480.00
超純化AAV病毒⼤量制備>5x1013 GC/ml50x200 ul￥267,280.00
提示：
1. GC = Genome copies。
2. 昆蟲杆狀病毒生産的AAV隻水的可選擇以下的AAV血清型：1、2、5、6、8、9。
3. 對(duì)于超純化AAV病毒，病毒顆粒經(jīng)過腦吧(guò)CsCl梯度密度離心純化。

科研級Plus AAV病毒包裝

我們的科研級Plus AAV病毒多身相較于常規科研級AAV具有更高的純度，适用于需要排除包裝細胞蛋白、内毒素等雜音遠質的極爲敏感的實驗應用，也适用于那些對(可厭duì)純化方式、滴度、配方等有動醫特定要求的需求。點擊查看科研級Plus AAV與訊爸常規科研級AAV在純化方式和質量标準上的比較。

生産規格應用病毒總量分裝價格（CNY）周期
超純化科研級Plus AAV小量制備多種(zhǒng)體外與體内應用1013 GC請咨詢￥29,980.00起(qǐ)10-20天
超純化科研級Plus AAV中量制備5x1013 GC￥103,980.00起(qǐ)21-28天
超純化科研級Plus AAV大量制備1014 GC￥166,980.00起(qǐ)
提示：
1. GC = Genome copies。
2. 上表的價格和周期是基于CsCl密度梯度離心的純玩讀化方法計算的。若您需要使用其它純化方法（碘克湖唱沙醇梯度密度離心、親和層析色譜、離子交換色譜等），請給我們發(fā)送咨詢。
服務詳情
病毒類型

我們提供的AAV類型

  • 單鏈AAV（Single-stran空商ded AAV，ssAAV）和自互補A物醫AV（Self-complementary AAV，s做內cAAV）
  • 多種(zhǒng)血清型：1、 2線微、3、4、5、6、6.2、7、8、9、rh10、PHP.eB、PH從音P.S、AAV2-retro、AAV2-QuadYF和AAV2.7m8但業等
  • AAV空殼和類病毒顆粒（Virus-like particle，VLP)

我們提供的AAV的包裝服務涵蓋以下血清型：

按照血清型分類
按照組織嗜性分類
血清型組織嗜性
AAV1平滑肌, 中樞神經(jīng)系統,&服他nbsp;肺, 視網膜, 内耳組師校織, 胰腺, 器還心髒, 肝
AAV2平滑肌, 中樞神經(jīng)系統,&n行就bsp;肝, 腎,&暗子nbsp;視網膜, 内耳組織
AAV3平滑肌, 肝, 肺
AAV4中樞神經(jīng)系統,&nbs章制p;視網膜, 肺, 腎
AAV5平滑肌, 中樞神經(j匠國īng)系統, 肺, 視網對信膜
AAV6平滑肌, 心髒, 肺, 脂肪組織, 肝
AAV6.2肺, 肝, 内耳組織
AAV7平滑肌, 視網膜, 中樞神經(jīng)系統,看哥 肝
AAV8平滑肌, 中樞神經(jīng)系統, 視網膜, 唱道内耳組織, 肝, 能路;胰腺, 心髒, 腎,&nb醫算sp;脂肪組織
AAV9平滑肌, 肺, 肝, 心髒, 外很;胰腺, 中樞神經(jīng)系也外統, 腦，視網膜, 内耳組拍間織, 睾丸, 腎
AAV-rh10平滑肌, 肺, 肝, 心髒, 胰腺, 師窗中樞神經(jīng)系統, 視網膜, 腎
AAV-DJ肝, 心髒, 腎, 脾
AAV-DJ/8肝, 腦, 脾都志
AAV-PHP.eB中樞神經(jīng)系統
AAV-PHP.S外周神經(jīng)系統
AAV2-retro脊神經(jīng)
AAV2-QuadYF内皮細胞
AAV2.7m8視網膜, 内耳組織
組織推薦使用的AAV血清型
平滑肌AAV1, AAV2, AAV3,&nbs理黑p;AAV5, AAV6, 睡腦;AAV7, AAV8, AAV9術制, AAV-rh10
中樞神經(jīng)系統AAV1, AAV2, AAV4, AAV5,&妹校nbsp;AAV7, AAV8, AAV9,&nbs爸分p;AAV-rh10, AAV-PHP.eB
外周神經(jīng)系統AAV-PHP.S
腦AAV1, AAV2, AAV5兵請, AAV7, A紅體AV8, AAV9, AAV-DJ/8
視網膜AAV1, AAV2, 新歌AAV4, AAV5, AAV7,&nb媽內sp;AAV8, AAV9,&房區nbsp;AAV-rh10, 看書AAV2.7m8
内耳組織AAV1, AAV2, AAV6.2, AA都友V8, AAV9, AAV2.7m8
肺AAV1, AAV3, AAV4, AAV5,銀裡 AAV6, AAV6.2, A說市AV9, AAV-rh10
肝AAV1, AAV2, AAV3,&nb他北sp;AAV6, AAV6.2, AA些吧V7, AAV8,&喝線nbsp;AAV9, AAV-rh10, 市吧AAV-DJ, AAV-DJ/8
胰腺AAV1, AAV2,&nb上視sp;AAV6, AAV8, AAV9靜能, AAV-rh10
心髒AAV1, AAV4, AAV5,&n章多bsp;AAV6, AAV8, A樂現AV9, AAV-rh10, AAV-DJ
腎AAV2, AAV4, AAV8為地, AAV9, AAV-rh10, 看們;AAV-DJ, AAV-DJ/8
脂肪組織AAV6, AAV8, AAV市會9
睾丸AAV2, AAV9
脾AAV-DJ, AAV-DJ/8
脊神經(jīng)AAV2-retro
内皮細胞AAV2-QuadYF

注意：攜帶目的基因的轉移質粒上的ITR序列來黑湖自于AAV2。一般來說(shuō)，包多綠裝不同血清型的AAV，指的是使用不同血清型的衣殼蛋白表達質粒，與攜大關帶AAV2 ITR的轉移質粒進(jìn)行包裝。

查看不同腺相關病毒血清型病毒衣殼蛋白1（VP1）個鐘的氨基酸序列 >>

交付内容
ssAAV
scAAV
昆蟲杆狀病毒生産AAV
非純化ssAAV制備服務純化ssAAV制備服務
交付内容

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，10x25 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，10x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1012GC/ml，10x100 ul

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應贈送店海：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，100 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，2x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1011GC/ml，2x100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(裡離duì)應選購：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul

輔助病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，10x25 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，10x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1012GC/ml，10x100 ul

輔助病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul
病毒重懸液50 mM Tris-based緩沖液pH7.4 PBS-based緩沖液
運輸/存儲幹冰/-80°C，避免反複通請凍融幹冰/-80°C，避免反複凍融
推薦應用體外培養細胞轉導體外培養細胞轉導、動物體内細胞轉導

對(duì)照病毒

爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們鐘快按照“對(duì)照病毒與定制病毒的生物學(xué)應用遠如相匹配”的原則給您贈送或者推薦對(duì)電票照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的對(duì)照病毒表達熒湖信光蛋白EGFP。如果定制病毒表達打林訊靶某個基因的shRNA，則對(duì)照病毒表達一個Scramble s錯村hRNA。推薦的對(duì)照病毒信息如下表所示：

對(duì)照病毒對(duì)照載體名稱對(duì)照載體ID定制病毒
EGFP對(duì)照AAV病毒pAAV[Exp]-CMV>EGFP:女議WPREVB010000-9394npt哺乳動物基因表達AAV病毒（包含Tet-On誘導表朋讀達和FLEX條件性表達）、哺乳動物AAV CRISPR系統、哺乳動物非編舊你碼RNA表達AAV病毒
mCherry對(duì)照AAV病毒pAAV[Exp]-CMV>mCherryVB900129-0800rvh
Scramble shRNA對(duì)照AAV病毒，EGFP熒生科光pAAV[shRNA]-CMV>EGFP-U草報6>Scramble_shRNAVB010000-0023jze哺乳動物shRNA幹擾AAV病毒
pAAV[shRNA]-CAG媽中>EGFP-U6>Scramb從道le_shRNAVB010000-9489hhg
Scramble shRNA對(duì)照AAV病毒，mCherry熒光現就pAAV[shRNA]-CMV>mC又吧herry-U6>Scr森低amble_shRNAVB010000-0024wah
Scramble miR30-sh銀一RNA對(duì)照AAV病毒術中，EGFP熒光pAAV[miR30]-CMV>志工EGFP:Scramble_miR30-shRNA:WPREVB010000-9397wgw哺乳動物miR30-shRNA幹擾AAV病毒
Tet-On EGFP 對(duì)照AAV病毒（得東選購）pAAV[Tet_on]-TRE>EGFP-理廠CBh>tTS:T2A:rtTAVB010000-0053bwh哺乳動物基因Tet-On誘導表達AAV病弟家毒
FLEX-EGFP對(duì)照AAV病毒（選購）玩就pAAV[FLEX_on]-CMV>rev(EG制雜FP)VB180820-1044gcq哺乳動物基因FLEX條件性表達AAV病毒

輔助病毒

爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按照“輔助病毒與定制病毒的門會生物學(xué)應用相匹配”的原則給您推薦計湖輔助病毒。例如，如果定制病毒是一個隻含TRE啓動子的TetOn慢病毒制長，則需要一個表達rtTA的輔助病毒，才能(néng)進(jìn)行誘導表達雪弟實驗。推薦的輔助病毒信息如下表所示：

輔助病毒輔助載體名稱輔助載體ID定制病毒
SaCas9 AAV病毒（選購）pAAV[Exp]-CMV>saCas9VB010000-9382per哺乳動物gRNA AAV病毒（不含Cas9）
Cre AAV病毒（選購）pAAV[Exp]-CMV>CreVB010000-9443kev哺乳動物基因FLEX條件性表達AAV病毒
非純化scAAV制備服務純化scAAV制備服務
交付内容

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，10x25 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，10x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1012GC/ml，10x100 ul

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(d著公uì)應贈送：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，100 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，2x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1011GC/ml，2x100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對討事(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul

輔助病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，10x25 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，10x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1012GC/ml，10x100 ul

輔助病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul
病毒重懸液50 mM Tris-based緩沖液pH7.4 PBS-based緩沖液
運輸/存儲幹冰/-80°C，避免反複凍融幹冰/-80°C，避免反複凍融
推薦應用體外培養細胞轉導體外培養細胞轉導、動物體内細胞轉導

對(duì)照病毒

爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按照“對(duì)照服我病毒與定制病毒的生物學(xué)理媽應用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對開會(duì)照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的對費業(duì)照病毒表達熒光蛋白EGFP。如果定制病毒表達打靶某個基因的shRNA可去，則對(duì)照病毒表達一個Scramble shRNA。推薦的對(du自妹ì)照病毒信息如下表所示：

對(duì)照病毒對(duì)照載體名稱對(duì)照載體ID定制病毒
EGFP對(duì)照scAAV病毒pscAAV[Exp]-CMV>EGFP:WPREVB010000-9304au放作d哺乳動物基因表達scAAV病毒了睡
Scramble shRNA對(duì)照scAAV病毒，EGF工但P熒光pscAAV[shRNA]-EG議作FP-U6>Scramble_shRNAVB010000-9343nhh哺乳動物shRNA幹擾scAAV病毒
純化AAV制備服務（通過(guò)杆狀病毒轉導Sf9昆蟲細胞制備遠黑）
交付内容

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>5x1013GC/ml，10x100 ul
  • 中量制備：>5x1013GC/ml，25x100 ul
  • ⼤量制備：>5x1013GC/ml，50 x 100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>5x1013GC/ml，10x100 ul
  • 中量制備：>5x1013GC/ml，25x100 ul
  • ⼤量制備：>5x1013GC/ml，50 x 100 ul
病毒重懸液pH7.4 PBS-based緩沖液
運輸/存儲幹冰/-80°C，避免反複凍融
推薦應用體外培養細胞轉導、動物體内細胞轉導

對(duì)照病毒

爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按照“對(d一要uì)照病毒與定制病毒的生物學(xué服雪)應用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對(duì)媽北照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的你匠對(duì)照病毒表達熒光蛋白EGFP。如果定制病毒表達打靶某個基要白因的shRNA，則對(duì)照病毒表達一個Scramble shRNA。推薦看事的對(duì)照病毒信息如下表所示：

對(duì)照病毒對(duì)照載體名稱對(duì)照載體ID定制病毒
超純化EGFP對(duì)照AA章我V病毒，杆狀病毒感染Sf9方法pBV-ITR-CMV>EGFP-ITRVB010000-9306ded哺乳動物基因表達AAV病毒（通過(guò)杆狀病毒轉導Sf9昆蟲細歌技胞制備）
運輸/儲存

我們的AAV病毒存儲在特殊的Tris緩沖液或PBS緩沖液中，并采用幹冰運輸。匠公收到AAV病毒後(hòu)，立即放置于-80村資℃，可保存約一年。若放置于-20℃，則謝信可保存2-3周。融解後(hòu)的AAV病小市毒可在4℃保存1-2周。雖然AAV病毒比其他多數病毒穩定（如慢病毒）她現，但是也請避免反複凍融，因爲這(zhè)會(huì)導緻AAV病毒匠男滴度顯著下降。

不同級别的AAV比較

下表比較了我們不同級别的AAV病毒。

科研級（非純化）科研級（超純化）科研級Plus
純化方式-CsCl梯度密度離心

CsCl梯度密度離心（默認）

碘克沙醇梯度密度離心（可選）

親和層析色譜（可選）

離子交換色譜（可選）

滴度> 1012 GC/ml> 1013 GC/ml1013 - 5x1013 GC/ml
純度（SDS-PAGE）-> 80%> 90%
内毒素水平< 30 EU/ml< 10 EU/ml< 2 EU/ml
完整衣殼比率-> 70%> 80%
生産/質控
三質粒轉染法生産AAV
昆蟲杆狀病毒生産AAV

我們通常使用三質粒系統包裝重組AAV病時用毒。該系統采用一個攜帶目的基因的轉移質粒相場、一個Rep-Cap表達質粒以及一個表達腺病毒基因（E2、E2熱友A和VA）的輔助質粒供轉染HEK293T包裝細胞。細胞短暫孵遠到育後(hòu)，根據血清型的不同，收集上清或者細胞裂解液市著，PEG濃縮獲取病毒顆粒。對(哥關duì)于超純化AAV（體内應用級别），再通過(guò)氯化铯（理為CsCl）密度梯度離心對(duì)病毒顆粒進(jì在筆n)一步純化和濃縮。

Typical workflow of tripel transfection-based AAV packaging and quality control.

圖1 三質粒法包裝AAV的典型流程

對(duì)于每一批我們生産的AAV病毒，我著但們的質量控制包括qPCR滴度檢測、微生物負荷檢測動得（針對(duì)細菌、真菌）、支原體檢測等。若轉移載體同用站時(shí)編碼一個熒光标記基因，我們還(hái)會(huì)將(j這對iāng)病毒進(jìn)行細胞轉導以測定相應的熒光表達情況。此外，對(d吧錢uì)于超純化AAV病毒，我們還(hái)可以檢測内毒素水平懂懂和使用SDS-PAGE方法檢測病毒純度。

我們的使用杆狀病毒包裝AAV的工作流程包括兩很我(liǎng)個主要步驟，如圖1所示。步驟1中産生兩(liǎng林愛)種(zhǒng)重組杆狀病毒，第一個表達目的基因（GOI），電熱其兩(liǎng)側有AAV反向(xiàng)末端重複序列 (Inv鐵業erted terminal repeat，ITR)這飛，第二個則是輔助杆狀病毒表達AAV rep和ca市鄉p基因。在步驟2中，通過(guò)將(j務作iāng)步驟1産生的兩(li我白ǎng)種(zhǒng)重組杆狀病毒共同河吃感染昆蟲細胞來産生重組AAV顆粒。

爲産生兩(liǎng)種(zhǒng)重組杆狀病毒（一種(兒分zhǒng)表達GOI，其兩(liǎng用朋)側是AAV ITR；另一種(zhǒng)表達AAV rep/cap基因日志），首先需要將(jiāng)每種(zhǒng)是上杆狀病毒的表達盒克隆至杆狀病毒轉移載體子影中。然後(hòu)將(jiāng)杆狀病毒轉移個街載體與表達Tn7轉座酶的輔助質粒共轉化至含有杆狀病毒穿梭空公又載體（又名杆粒）的細菌宿主中，以産生重組杆粒。然後(hòu)章山將(jiāng)重組杆粒轉染到昆蟲Sf9細胞中。經(jīng看討)過(guò)短暫的孵育期，從培養基中收集病呢微毒顆粒并使用蔗糖梯度密度離心進(jìn)一步濃縮。我飛長們采用qPCR測定杆狀病毒滴度。然後(hòu)將(jiāng)兩(liǎ鐵了ng)種(zhǒng)重組杆狀病毒共感染昆蟲細胞中。在72-96 小時(shí章鐘)的孵育期後(hòu)，從細胞鄉人裂解液和上清液中收集AAV顆粒，并通過(guò坐東)PEG沉澱法進(jìn)行濃縮。對(duì)于超純化 AAV（體内應用紙暗級别），AAV病毒顆粒通過(guò)氯化铯 (CsCl) 梯度超速離心進(錯校jìn)一步純化和濃縮。我們使用qPCR測定AAV滴度。

圖2 Baculovirus-AAV的典型計北生産流程

對(duì)于每個我們生産的AAV，我們的QC包括來那qPCR滴度測定（Titer mea亮窗surement）、微生物檢測（Bioburden test，針對(到慢duì)細菌、真菌）、支原體檢測（Mycopl司很asma test）等。若轉移載體同時(shí)編碼一個時花熒光蛋白，我們還(hái)會(huì)將(jiāng)病毒進冷理(jìn)行細胞轉導以測定相應的熒光表達情況（Transduct微長ion test）。此外，對(duì)于超純化AAV病毒關離，我們還(hái)可以檢測内毒素水平（End森麗otoxin test）和使用S的間DS-PAGE方法檢測病毒純度（Virus purity test）。

下表展示了我們可提供的AAV QC方法算兒。

其它可選購的QC服務方法
滴度檢測ddPCR
TCID50
AAV複制能(néng)力檢測qPCR
完整衣殼/空衣殼分析TEM
CDMS
SV-AUC
滴度保證

我們的滴度保證僅适用于包裝進(jìn)病毒的區域（從5’腦廠 ITR到3’ ITR）小于腺相關病毒承載限度（4.7 k樂暗b，～野生型AAV2基因組長(cháng)度）的載體。超過(gu火低ò)該範圍，超出4.7 kb的那部分序列在包入衣殼時(shí)會(hu村讀ì)被(bèi)剪切掉，導緻包裝出來的時化AAV病毒顆粒含有不完整的基因東熱組，不僅影響ITR qPCR滴度檢測去話，而且影響轉基因表達。此外，對(duì)于如下情況，我們同樣(yàng我員)不能(néng)保證滴度：

  • AAV血清型3和4的滴度通常偏低。對(duì)于這(zhè)些血清型我們保相黃證其滴度是其它血清型最小滴度的50%。
  • 包含對(duì)包裝過(guò)程有不利舞都影響的序列，例如毒性基因（如促凋志自亡基因）；破壞包裝細胞或病毒的完整性（如導緻細胞聚集的膜蛋窗用白）的基因 ；易于重排或者産生二級結構的序列校藍（如重複序列或者高GC含量序列）。
  • ⽤戶提供的載體，因爲我們無法控制載體質量。
客戶提供載體

如需客戶提供AAV病毒載體，則請按照外來物品接收指南將(jiāng)載體寄送給我們。請嚴格按照我們的指南來銀動進(jìn)行裝運以免造成(ché你用ng)物品的任何延誤和損壞。客戶提供的所有材料均需經(jīn讀姐g)過(guò)QC檢測，每一份材料附加檢測費用。請注意，客戶提供物東物品接收并通過(guò)QC之後(hòu)生産才正式開(kāi)始。

試驗驗證

三質粒轉染法生産的AAV

我們開(kāi)發(fā)了一河件系列專有技術用以優化三質粒轉染法包裝AAV的效率。我們的三章服質粒轉染法包裝的AAV在哺乳動物細是音胞中表現出很高的轉導效率。

視頻

暫無

文檔

使用說(shuō)明書

腺相關病毒體外應用

腺相關病毒體内應用

基因治療專題

心髒研究專用AAV

神經(jīng)研究專用AAV

肝髒研究專用AAV

肌肉研究專用AAV

COA

常見問題解答
慢病毒MMLV腺病毒AAV
組織嗜性廣泛廣泛hAd5隻感染表達CAR受體的細胞取決于血清型
是否可感染非分裂細胞是否是是
病毒基因組穩定整合抑或遊離于宿主基因組穩定整合穩定整合遊離的DNA附加體形式遊離的DNA附加體形式
自定義啓動子是否是是
應用細胞培養和體内實驗細胞培養和體内實驗體内實驗體内實驗
體内免疫反應低低高非常低

我們通過(guò)裂解AAV病毒顆粒，然後(hò山煙u)以qPCR測定裂解産物中的AAV基因組拷貝數（ITR區域的拷我少貝數）來獲取AAV的物理滴度（Physi算生cal titer）。其他滴度測定方式如ddPCR、T小鄉CID50以選購方式提供。

相關服務
AAV載體構建
AAV血清型彩虹裝
AAV類病毒顆粒
腺病毒包裝
慢病毒包裝
shRNA 3+1套裝
設計載體 發(fā)送咨詢
載體設計