莫洛尼氏鼠白血病逆轉錄病毒（Moloney murine 白行;leukemia retrovirus，簡稱MMLV）是第一個被(熱錯bèi)廣泛使用的基因轉移載體，并且是第一個使用e員門x vivo策略治療遺傳性疾病的載體（R.M. Blaese 1995）。使用逆轉錄病毒載體的優勢之一是載體費見基因組永久整合到宿主基因組中，可長(cháng)期穩定地表達轉基因。MMLV逆討鐵轉錄病毒隻能(néng)感染分裂的細胞，主看數要原因是它們無法穿過(guò)核膜，隻能(néng)在細胞分裂過(gu還兒ò)程中通過(guò)不完整的核膜來完成(chéng)感染兵體。MMLV逆轉錄病毒的生産需要在一個包林如裝細胞中，從單獨的包裝質粒中反式表達病毒Gag錯開、Pol和Env蛋白。我們開(kāi)發(fā)出一熱匠系列專有技術和試劑，從病毒滴度、純度、活性以及一緻性報視等方面(miàn)顯著提升了逆又什轉錄病毒包裝工藝水平。
| 生産規格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格（CNY） | 周期 |
| MMLV逆轉錄病毒⼩量制備 | >2.5x106 TU | >107 TU/ml | 10x25 ul | ￥3,180.00 | 6-12天 |
| MMLV逆轉錄病毒中量制備 | >107 TU | >107 TU/ml | 10x100 ul | ￥4,680.00 | |
| MMLV逆轉錄病毒大量制備 | >108 TU | >108 TU/ml | 10x100 ul | ￥7,780.00 | |
| 超純化MMLV逆轉錄病毒⼤量制備 | >108 TU | >108 TU/ml | 10x100 ul | ￥11,880.00 |
我們提供2種(zhǒng)逆轉錄病毒包裝服務：
| 非純化MMLV逆轉錄病毒制備服務 | 純化MMLV逆轉錄病毒制備服務 | |
| 交付内容 | 定制病毒，按照規格交付：
| 定制病毒，按照規格交付：
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對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應贈送：
| 對(duì)照病毒，按照定制病毒南廠的規格對(duì)應選購：
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| 聚凝胺（Polybrene，5 mg/ml，200 ul低見），贈送 | 聚凝胺（Polybrene，5 mg/ml秒白，200 ul），贈送 | |
| 病毒重懸液 | HBSS緩沖液 | HBSS緩沖液 |
| 運輸/存儲 | 幹冰/-80°C，避免反複凍融 | 幹冰/-80°C，避免反複凍融海如 |
| 推薦應用 | 體外培養細胞轉導 | 體外培養細胞轉導、動物體内細胞轉導 |
對(duì)照病毒
爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按照“對(duì)照病讀學毒與定制病毒的生物學(xué)應用相匹配”的原則給您贈送或者地行推薦對(duì)照病毒。例如，如果定制舊腦病毒表達一個基因，則推薦的對(duì)照病毒表達熒光兵些蛋白EGFP。推薦的對(duì)照病毒信息如下表所示章短：
| 對(duì)照病毒 | 對(duì)照載體名稱 | 對(duì)照載體ID | 定制病毒 |
| EGFP對(duì)照MMLV逆轉錄病毒， Pu答唱ro抗性 | pMMLV[Exp]-EGFP:T2A:Puro | VB010000-9307ddn | 哺乳動物基因表達MMLV逆轉錄病毒、哺乳動物非編碼RNA表達MMLV逆轉錄服體病毒 |
| EGFP對(duì)照自失活MMLV逆轉錄病毒， Puro抗性 | pMMLV-SIN[Exp]-MSCV>EGFP:T2河請A:Puro | VB010000-9478ycv | 自失活MMLV逆轉錄病毒 |
我們的MMLV逆轉錄病毒存儲在HBSS章數緩沖液中，并采用幹冰運輸。收到病毒後(hòu)都妹，立即放置于-80℃，長(cháng美做)期貯存至少6個月。MMLV逆轉錄病毒的保質期約爲一年是有。請避免反複凍融，因爲這(zhè)會(huì)導緻病毒滴度大幅下降。吧員
| 步驟 | 描述 | 時(shí)間 |
Co-transfection | 我們常規使用的MMLV逆轉錄病毒包裝系統包括1個轉移質粒（Transfer p校玩lasmid）、1個膜蛋白表達質粒（Envelo術森pe plasmid）、1個包裝質粒（Packaging 時女plasmid），將(jiān鐘也g)這(zhè)些質粒共轉染包裝細胞。包裝質粒爲Gag/Pol表達質粒。 | 第1天 |
Supernatant collection | 在細胞裡(lǐ)，轉移質粒轉錄出攜帶目的基因（Gene店子 of Interest，簡稱G區商OI）的MMLV RNA基因組，與計熱包裝質粒表達出的衣殼結構蛋白、酶、調控蛋白組裝成(c笑她héng)病毒顆粒後(hòu)，轉運到細胞膜内側，形成(chéng)包膜病明技毒分泌到胞外。膜蛋白質粒表達的VSV-G膜蛋白錨定在細胞膜上，随著(銀高zhe)病毒成(chéng)熟，這兵與細胞膜一起(qǐ)成(chéng)爲了病毒的膜。細胞短暫孵育後(hò場坐u)，收集上清，離心去除細胞碎片并過(guò)濾。 | 第3天 |
Concentration and purification | PEG濃縮病毒顆粒。對(duì)不農于超純化MMLV逆轉錄病毒（體内應用級雪相别），采用蔗糖離心方法進(jìn了笑)一步純化、濃縮病毒。 | 第4天 |
Quality Control | 對(duì)病毒進(jìn)行滴度測定（T電秒iter determination）、微生物檢測（Bioburden 窗要test，針對(duì)細菌、真菌計東）、支原體檢測（Mycoplasma test）等。 若轉移載體同時(shí)編碼一個熒光蛋白，大視我們還(hái)會(huì)將(jiāng)病毒進(jìn)行細胞轉導以測門不定相應的熒光表達情況（Transduction test）。此外答自，對(duì)于超純化MMLV逆轉錄病毒，我們還(hái)可內就以檢測内毒素水平（Endotox湖草in test）。 | 第5天及以後(hòu) |
我們的滴度保證僅适用于包裝進(jìn)病毒的區域（從5’ LTR的R元從男件的第一個堿基到3’ LTR的R元件玩司的最後(hòu)一個堿基）小于MMLV逆轉錄病毒承載限度（8 kb，些拍～野生型MMLV逆轉錄病毒基因組長(cháng)度）的載體。超過(guò)該資東範圍，載體也許會(huì)被(bèi)包裝進(為刀jìn)病毒，但會(huì)造成(chéng會路)病毒滴度降低。此外，對(duì)于如下載體，我們同樣(yàng)不能(土計néng)保證滴度：
交付周期是指訂單接收到發(fā)貨之靜制間的時(shí)間，不包括需要客戶數秒提供任何物料（如病毒載體）的等待時(shí)間。
如需客戶提供MMLV病毒載體，則請按文現照外來物品接收指南將(jiāng)載體寄送給我們人日。請嚴格按照我們的指南來進(jìn)行裝運以免造成(chéng)物熱喝品的任何延誤和損壞。客戶提供的所鄉門有材料均需經(jīng)過(g算煙uò)QC檢測，每一份材料附加檢測費用。請注意，姐著客戶提供物品接收并通過(guò)QC之後(hò和事u)生産才正式開(kāi)始。
暫無
使用說(shuō)明書
| 慢病毒 | MMLV | 腺病毒 | AAV | |
| 組織嗜性 | 廣泛 | 廣泛 | hAd5隻感染表達CAR受體的細胞 | 取決于血清型 |
| 是否可感染非分裂細胞 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 病毒基因組穩定整合抑或遊離于宿主基因組 | 穩定整合 | 穩定整合 | 遊離的DNA附加體形式 | 遊離的DNA附加體形式 |
| 自定義啓動子 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 應用 | 細胞培養和體内實驗 | 細胞培養和體内實驗 | 體内實驗 | 體内實驗 |
| 體内免疫反應 | 低 | 低 | 高 | 非常低 |
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