水疱性口炎病毒（VSV）

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服務詳情

雲舟生物開(kāi)發(fā)了兩(liǎng)種冷校(zhǒng)載體骨架用于克隆VSV基因組。兩(liǎng)個骨架均森吃包含有活性的VSV基因組成(chéng)分，但是不含有G糖蛋白。第一個載體玩頻包含VSV-M和VSV-L基因，可以被(bèi)用于克隆您的目的基因（圖友男1a）。第二個載體在VSV-N基因上遊增加了一個報告基因（圖1b）。如果您近我還(hái)需要其它版本的載體，請聯系我們。

圖1 VSV載體骨架，包含VSV N-P-M-L基因

病毒類型

• VSV-G膜蛋白覆蓋的VSV病毒
• 使用其他膜蛋白進(jìn)行假病毒化的VSV病毒（如使用冠狀爸計病毒刺突蛋白）
• 無膜蛋白的表面(miàn)光秃的VSV病毒（可用于陰性對(duì)照）志銀

交付内容

	非純化VSV制備服務	純化VSV制備服務
交付内容	定制病毒，按照規格交付： 中量制備：>107PFU/ml，10x100 ul ⼤量制備：>108PFU/ml，10x100 ul	定制病毒，按照規格交付： 中量制備：>108PFU/ml，5x100 ul ⼤量制備：>108PFU/ml，10x100 ul
	對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應贈送： 中量制備：>107PFU/ml，2x100 ul ⼤量制備：>108PFU/ml，2x100 ul	對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對友湖(duì)應選購： 中量制備：>108PFU/ml，5x100 ul, ￥3,來東800 ⼤量制備：>108PFU/ml，10x100 ul,&nb理新sp;￥6,100
病毒重懸液	HBSS緩沖液	HBSS緩沖液
運輸/存儲	幹冰/-80°C，避免反複凍融	幹冰/-80°C，避免反複凍融
推薦應用	體外培養細胞轉導	體外培養細胞轉導、動物體内細胞轉導

對(duì)照病毒

爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按照上秒“對(duì)照病毒與定制病毒的生物學(xué)應用相匹配”的原則給您贈送或媽動者推薦對(duì)照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推長影薦的對(duì)照病毒表達熒光蛋白EGFP。如要師果定制病毒表達打靶某個基因的shRNA，則對(廠裡duì)照病毒表達一個Scramble shRNA。推薦的對對器(duì)照病毒信息如下表所示：

對(duì)照病毒	對(duì)照載體名稱	對(duì)照載體ID	定制病毒
EGFP對(duì)照VSV病毒	pVSV[Exp]-EGFP	VB010000-9315gcp	哺乳動物基因表達VSV病毒

運輸/儲存

我們的VSV病毒存儲在HBSS緩沖液中，并采用幹冰運輸。錯短收到VSV病毒後(hòu)，請立即放置于-80℃，長(cháng)期貯存至少6動煙個月。VSV病毒的保質期約爲一年。請避免反複凍融，因爲這(zhè讀遠)會(huì)導緻慢病毒滴度大幅下降。

生産/質控

圖2展示了VSV的包裝流程。VSV包短煙裝使用VSV-ΔG轉移質粒，該質粒不表達G糖蛋白，但懂一是攜帶有目的基因，包裝時(shí)連同五個輔助質粒共同轉染包裝細胞。五飛子個輔助質粒分别表達VSV N、P、G、L蛋白，以及T7 費農RNA聚合酶。包裝質粒表達的病毒蛋白對(duì)于含有目的基因的病毒顆對下粒組裝是必須的。對(duì)比傳統利用輔助病毒的包裝方法，時喝該流程可有效減少病毒包裝周期，增飛好加病毒純度（無輔助病毒）。制備覆蓋有G糖蛋白的VSV後(hòu)，收集聽門細胞上清，再次感染包裝細胞。此時(shí男信)若同時(shí)轉染一個表達異源包膜蛋白的質粒，則可小微以獲得假型化的VSV病毒。對(duì)于超純化的VSV病毒（體内應們答用級别），使用蔗糖密度梯度離心法濃縮純化。我們使用噬斑法檢測滴度。