如何在體内外實驗中使用piggyBac載體系統？

PiggyBac系統包含兩(liǎng)個載體，一個載體被民上(bèi)稱爲輔助質粒，負責編碼轉座酶；另一個載體被(bèi)稱爲轉座子質粒空笑，包含兩(liǎng)個反向(xiàng)末端重複序列務自（ITRs）以及兩(liǎng)者之間的被(bèi)轉座區域，需醫讀要被(bèi)轉座到宿主基因組中的目的基因（或其他片段）就(jiù)克隆在員窗這(zhè)個區域。

當輔助質粒和轉座子質粒共轉染靶細胞時(sh雨離í)，輔助質粒産生的轉座酶將(jiāng)會(huì)識别小車轉座子的兩(liǎng)個ITR元件林男，然後(hòu)將(jiāng)被(bèi)轉座火著區和兩(liǎng)個ITR元件插入到低著宿主基因組中。轉座插入通常發(fā)生在包含T煙劇TAA序列的宿主染色體位點，并在轉錢筆座子兩(liǎng)側出現TTAA重複序列。

在細胞培養體系中使用piggyBac載體系統相對(懂電duì)簡單，可以連續轉染或共轉染轉座子和輔助質粒，也可以使用電轉的方法代替但議化學(xué)轉染。

然而，在活體動物中，化學(xué)轉染和電轉介導的質粒共轉效率都(dōu腦去)較低。一些研究人員則分開(kāi)制作表達轉綠書座子和轉座酶的轉基因動物，然後(hòu)將(jiāng)兩(liǎng廠章)個轉基因動物進(jìn)行雜交；或是將(jiāng)單獨的質粒轉到劇事表達轉座子或轉座酶的轉基因動物中以誘導轉座子發(fā)生轉座（如Ding et al. Cell. 122:473-下木83；Horn et el. Geneti姐工cs. 163:647-61）。

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