常見問題
藥物篩選标記 熒光蛋白 基因組編輯 蛋白表達 shRNA 病毒包裝 其他
VectorBuilder提供了小對多種(zhǒng)藥物篩選标記,如嘌呤黴素(Puro),新黴素(醫河Neo),潮黴素B(Hygro B)和殺稻瘟菌素(Bsd)。輛錯Puro比其他抗生素能(néng)更快、更均一地殺死非抗性細胞。票房因此,對(duì)大多數細胞而言,我們推薦使用Pur雨暗o。然而,某些細胞會(huì)天然地對(duì)某些抗生素具有某種(zhǒng玩森)程度的抗性,或者即便含有抗性基因,一些細胞對(duì)某些抗生素也樹山十分敏感。這(zhè)時(shí)就裡個(jiù)需要對(duì)細胞進厭笑(jìn)行不同的抗藥篩選測試以找到最合适的标記類型和濃度。
常用抗生素工作濃度和藥篩時(shí)間
抗生素 | 測試細胞 | 推薦工作濃度 | 推薦藥篩時(shí)間 |
Puromycin | 293T | 1-2 ug/ml | 3-5 天 |
Geneticin (G418) | HT1080 | 500-1000 ug/ml | 7-11 天 |
Blasticidin | 293T | 5-15 ug/ml | 7-11 天 |
Hygromycin B | 293T | 100-200 ug/ml | 5-7 天 |
注意:
a. G418應用于Neomycin抗性基因篩選
b. 傳代細胞可加快Blasticidin篩選