莫洛尼氏鼠白血病逆轉錄病毒（Moloney murin票微e leukemia r舊短etrovirus，簡稱MMLV）是第一個被(bèi)廣泛使用的基因轉移載體師月，并且是第一個使用ex vivo策略治坐土療遺傳性疾病的載體（R.M. Blaese 1995）。使用逆轉錄病毒載體的優勢之一是載體基因組永久整合到宿水現主基因組中，可長(cháng)期穩定地表達轉基因。MML水數V逆轉錄病毒隻能(néng)感染分裂的細胞，主要原因站計是它們無法穿過(guò)核膜，隻能(néng)在細書嗎胞分裂過(guò)程中通過(guò)不完整的核膜來完成子年(chéng)感染。MMLV逆轉錄病毒的生産需要在一個包裝細胞中，從單獨的包裝兒雪質粒中反式表達病毒Gag、Pol和Env蛋白。我們黑店開(kāi)發(fā)出一系列專有技術和呢影試劑，從病毒滴度、純度、活性以及一緻性等方面(mià歌船n)顯著提升了逆轉錄病毒包裝工藝水平。
| 生産規格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格（CNY） | 周期 |
| MMLV逆轉錄病毒⼩量制備 | >2.5x106 TU | >107 TU/ml | 10x25 ul | ￥3,180.00 | 6-12天 |
| MMLV逆轉錄病毒中量制備 | >107 TU | >107 TU/ml | 10x100 ul | ￥4,680.00 | |
| MMLV逆轉錄病毒大量制備 | >108 TU | >108 TU/ml | 10x100 ul | ￥7,780.00 | |
| 超純化MMLV逆轉錄病毒⼤量制備 | >108 TU | >108 TU/ml | 10x100 ul | ￥11,880.00 |
我們提供2種(zhǒng)逆轉錢農錄病毒包裝服務：
| 非純化MMLV逆轉錄病毒制備服務 | 純化MMLV逆轉錄病毒制備服務 | |
| 交付内容 | 定制病毒，按照規格交付：
| 定制病毒，按照規格交付：
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對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應贈送喝醫：
| 對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：
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| 聚凝胺（Polybrene，5林林 mg/ml，200 ul），贈送 | 聚凝胺（Polybrene，5 mg/ml，200 ul），贈綠們送 | |
| 病毒重懸液 | HBSS緩沖液 | HBSS緩沖液 |
| 運輸/存儲 | 幹冰/-80°C，避免反複凍融 | 幹冰/-80°C，避免反複凍融 |
| 推薦應用 | 體外培養細胞轉導 | 體外培養細胞轉導、動物體内細胞轉導 |
對(duì)照病毒
爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按照“對(duì)照病少計毒與定制病毒的生物學(xué)應窗工用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對(duì)兒拍照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的對(duì)照病毒表達熒輛舊光蛋白EGFP。推薦的對(du那村ì)照病毒信息如下表所示：
| 對(duì)照病毒 | 對(duì)照載體名稱 | 對(duì)照載體ID | 定制病毒 |
| EGFP對(duì)照MMLV逆轉錄病毒， Puro抗性 | pMMLV[Exp]-EGFP:T2A科錢:Puro | VB010000-9307ddn | 哺乳動物基因表達MMLV逆轉錄病毒、哺個間乳動物非編碼RNA表達MMLV逆轉錄病毒 |
| EGFP對(duì)照自失活MMLV逆轉錄病毒，好舊 Puro抗性 | pMMLV-SIN[Exp]-亮制MSCV>EGFP:T2A:Puro | VB010000-9478ycv | 自失活MMLV逆轉錄病毒 |
我們的MMLV逆轉錄病毒存儲在HBSS緩沖液中，并采用幹冰運輸。收到病雨靜毒後(hòu)，立即放置于-80℃，長(c從明háng)期貯存至少6個月。MMLV逆轉錄病毒的保質費事期約爲一年。請避免反複凍融，因爲這(zhè)會(huì)新中導緻病毒滴度大幅下降。
| 步驟 | 描述 | 時(shí)間 |
Co-transfection | 我們常規使用的MMLV逆轉錄病毒包裝系統包括1個轉移質粒（來美Transfer plasmid）、歌南1個膜蛋白表達質粒（Envelope plasmid）、1個包裝質粒（做分Packaging plasmid），將(jiāng市朋)這(zhè)些質粒共轉染包裝細胞。包裝質粒爲Gag/Pol表達質粒。 | 第1天 |
Supernatant collection | 在細胞裡(lǐ)，轉移質粒轉錄出攜帶目的基因（G紙又ene of Interest，簡稱GOI）的MMLV RNA基因組，與包裝質謝可粒表達出的衣殼結構蛋白、酶、調控蛋白組裝成(chéng)病毒顆粒後(hò紅筆u)，轉運到細胞膜内側，形成(chéng)包影鄉膜病毒分泌到胞外。膜蛋白質粒表達的VSV-G膜蛋白錨定在細胞膜上子呢，随著(zhe)病毒成(chéng)熟，與細胞膜一高個起(qǐ)成(chéng)爲了病毒的膜。細胞短暫孵長學育後(hòu)，收集上清，離心去除細胞碎片并過計他(guò)濾。 | 第3天 |
Concentration and purification | PEG濃縮病毒顆粒。對(duì)于超純化MMLV逆轉錄病毒（體内愛女應用級别），采用蔗糖離心方法進(jìn)一步純化、濃縮病毒。 | 第4天 |
Quality Control | 對(duì)病毒進(jìn)行滴度測定（T我機iter determination）、微生物檢測（B個章ioburden test，針對(duì)細菌、真菌）、支原體檢測（Myc話的oplasma test）等。 若轉移載體同時(shí)編碼一個熒光蛋白，我們還(hái)會(huì)見通將(jiāng)病毒進(jìn)行吧水細胞轉導以測定相應的熒光表達情亮件況（Transduction test）。此外，對(duì拍老)于超純化MMLV逆轉錄病毒，我市高們還(hái)可以檢測内毒素水平（Endotoxin test）。 | 第5天及以後(hòu) |
我們的滴度保證僅适用于包裝進(jìn)紅秒病毒的區域（從5’ LTR的R元件的第一個堿基到3林媽’ LTR的R元件的最後(hòu)一個堿基）小于M購歌MLV逆轉錄病毒承載限度（8 kb，～野生型MMLV逆轉錄病毒基因組長(c自花háng)度）的載體。超過(guò)該範圍，載體也許會市跳(huì)被(bèi)包裝進(jìn)病毒，但會(huì)造成(ch動靜éng)病毒滴度降低。此外，對(duì)于如下載體，我們同樣(yàng)書吃不能(néng)保證滴度：
交付周期是指訂單接收到發(fā)貨之綠唱間的時(shí)間，不包括需要客遠她戶提供任何物料（如病毒載體）的等待時(shí民厭)間。
如需客戶提供MMLV病毒載體，則請按照外來物品接收指南將(jiāng)載體寄送給我們。請嚴格按照我們的指南來進(jìn)行看學裝運以免造成(chéng)物品的任何延誤和損壞。客戶提供睡還的所有材料均需經(jīng)過(guò)QC檢測，每一份材農學料附加檢測費用。請注意，客戶提供山通物品接收并通過(guò)QC之後(hòu)生産才正式開(kāi)始。
暫無
使用說(shuō)明書
| 慢病毒 | MMLV | 腺病毒 | AAV | |
| 組織嗜性 | 廣泛 | 廣泛 | hAd5隻感染表達CAR受體的細胞 | 取決于血清型 |
| 是否可感染非分裂細胞 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 病毒基因組穩定整合抑或遊離于宿主基因組 | 穩定整合 | 穩定整合 | 遊離的DNA附加體形式 | 遊離的DNA附加體形式 |
| 自定義啓動子 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 應用 | 細胞培養和體内實驗 | 細胞培養和體内實驗 | 體内實驗 | 體内實驗 |
| 體内免疫反應 | 低 | 低 | 高 | 非常低 |
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