科研級載體與病毒服務
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進(jìn)一步了解 >> 我們的質量體系通過(guò)I花習SO 9001認證。這(zhè)些産品是在我們先進(j拍海ìn)的設施中嚴格控制下生成(chéng)的。

腺相關病毒

重組腺相關病毒（AAV）是一種(zhǒ又事ng)在體外或體内實驗中均被(bèi)廣泛使用的病毒載體。AAV可以北熱轉導大量類型的哺乳動物細胞，并且在水他人體中表現爲無緻病性和低免疫原性，西聽這(zhè)些特點使其成(chéng)爲當前應用于基因治療分好領域中其中一種(zhǒng)最高效的基因遞送載體可要。雲舟生物提供高質量的AAV病毒風讀包裝服務，可以滿足AAV基因治療相鄉知關的實驗需求。我們開(kāi)發(fā)出一系列專有技術，從病毒滴度、議火純度、活性以及一緻性等方面(miàn)顯著提線白升了AAV病毒包裝工藝水平，特别是經(jīng)由我們設計的AAV載體。我文機們的AAV病毒具有良好(hǎo)的客戶評價。我們除了可以提供科研級的AAV病毒包裝服務外，還(hái)可以提供用于臨床應用的GMP級别AAV制備服務。

訂購信息
ssAAV
scAAV
昆蟲杆狀病毒生産AAV
科研級Plus AAV

科研級AAV病毒包裝

我們的科研級AAV病毒包裝服務可以滿足多樣(yàng)的AAV基因遞送錢姐實驗需求。您可以選擇三質粒轉染法包裝AAV或者使用昆蟲杆狀病毒黃生生産AAV。

生産規格應用最小滴度分裝價格（CNY）周期
ssAAV病毒⼩量制備細胞培養> 2x1011 GC/ml10x25 ul￥3,180.006-12天
ssAAV病毒中量制備10x100 ul￥4,680.00
ssAAV病毒大量制備> 2x1012 GC/ml10x100 ul￥7,780.00
超純化ssAAV病毒⼩量制備細胞培養和體内應用> 1013 GC/ml4x25 ul￥9,780.007-14天
超純化ssAAV病毒中量制備10x50 ul￥13,980.00
超純化ssAAV病毒⼤量制備10x100 ul￥19,980.00
超純化ssAAV病毒超⼤量制備10x500 ul￥69,280.00起(qǐ)23-33 天
超純化ssAAV病毒特⼤量制備10x1 ml￥111,280.00起(qǐ)40-50 天
其它規格請咨詢
提示：
1. GC = Genome copies。
2. AAV血清型3、4的滴度通常偏低。對(duì)于這(zhè)些血白湖清型我們保證其滴度是其它血清型最小滴度的50%。
3. 對(duì)于超純化AAV病毒，病毒顆粒經(jīn山房g)過(guò)CsCl梯度密度離心純化。

科研級AAV病毒包裝

我們的科研級AAV病毒包裝服務可以滿足多樣(yàng訊分)的AAV基因遞送實驗需求。您可藍生以選擇三質粒轉染法包裝AAV或者使用昆蟲杆狀病毒生産AAV。

生産規格應用最小滴度分裝價格（CNY）周期
scAAV病毒⼩量制備細胞培養> 2x1011 GC/ml10x25 ul￥3,180.006-12天
scAAV病毒中量制備10x100 ul￥4,680.00
scAAV病毒大量制備> 2x1012 GC/ml10x100 ul￥7,780.00
超純化scAAV病毒⼩量制備細胞培養和體内應用> 1013 GC/ml4x25 ul￥9,780.007-14天
超純化scAAV病毒中量制備10x50 ul￥13,980.00
超純化scAAV病毒⼤量制備10x100 ul￥19,980.00
超純化scAAV病毒超⼤量制備10x500 ul￥69,280.00起(qǐ)23-33 天
超純化scAAV病毒特⼤量制備10x1 ml￥111,280.00起(qǐ)40-50 天
其它規格請咨詢
提示：
1. GC = Genome 制金copies。
2. AAV血清型3、4的滴度通的如常偏低。對(duì)于這(zhè)些血清型我廠弟們保證其滴度是其它血清型最小滴度的50%。
3. 對(duì)于超純化AAV病毒，病毒顆粒經(冷去jīng)過(guò)CsCl梯度密度離心純化。

科研級AAV病毒包裝

我們的科研級AAV病毒包裝服務可以滿足多樣(yàng她關)的AAV基因遞送實驗需求。您可以選擇三質粒轉染法包裝AAV或者使用昆蟲杆狀病分離毒生産AAV。

生産規格應用最小滴度分裝價格（CNY）周期
超純化AAV病毒⼩量制備細胞培養與體内應用>5x1013 GC/ml10x100 ul￥39,200.0035-49天
超純化AAV病毒中量制備>5x1013 GC/ml25x200 ul￥141,480.00
超純化AAV病毒⼤量制備>5x1013 GC/ml50x200 ul￥267,280.00
提示：
1. GC = Genome copies。
2. 昆蟲杆狀病毒生産的AAV隻可選擇以下的AAV市城血清型：1、2、5、6、8、9。
3. 對(duì)于超純化AAV病毒，病樹外毒顆粒經(jīng)過(guò)CsCl梯度密度離心純化。

科研級Plus AAV病毒包裝

我們的科研級Plus AAV病毒相較于常規科研級AAV具科爸有更高的純度，适用于需要排除包裝細胞蛋白、内毒素等雜質的這個極爲敏感的實驗應用，也适用于那些對(duì)純化方式、可鐘滴度、配方等有特定要求的需求。點擊查看科研級Plus AAV與常規科研級AAV在純化方式和質草報量标準上的比較。

生産規格應用病毒總量分裝價格（CNY）周期
超純化科研級Plus AAV小量制備多種(zhǒng)體外與體内應用1013 GC請咨詢￥29,980.00起(qǐ)10-20天
超純化科研級Plus AAV中量制備5x1013 GC￥103,980.00起(qǐ)21-28天
超純化科研級Plus AAV大量制備1014 GC￥166,980.00起(qǐ)
提示：
1. GC = Genome copies。
2. 上表的價格和周期是基于CsCl密度梯度離心的純化方法計算的。若您需花動要使用其它純化方法（碘克沙醇梯度密度離心、親和層析色譜、離子交換色譜等），南錢請給我們發(fā)送咨詢。
服務詳情
病毒類型

我們提供的AAV類型

  • 單鏈AAV（Single-strande離筆d AAV，ssAAV）和自互補AAV（Self-compleme習亮ntary AAV，scAAV）
  • 多種(zhǒng)血清型：1、們照 2、3、4、5、6、6.2、7短木、8、9、rh10、PHP.eB、PHP.S下現、AAV2-retro、AAV2-QuadYF和AA厭跳V2.7m8等
  • AAV空殼和類病毒顆粒（Virus-like p唱銀article，VLP)

我們提供的AAV的包裝服務涵蓋以下血清型：

按照血清型分類
按照組織嗜性分類
血清型組織嗜性
AAV1平滑肌, 中樞神經(jīng)系統, 線有;肺, 視網膜, 内耳組織, 胰腺,&n短在bsp;心髒, 肝
AAV2平滑肌, 中樞神經(jīng)系統, 肝,自上 腎, 視網膜,&線錢nbsp;内耳組織
AAV3平滑肌, 肝, 肺
AAV4中樞神經(jīng)系統, 視網膜,&土女nbsp;肺, 腎
AAV5平滑肌, 中樞神經(jīng)系統,在家 肺, 視網膜
AAV6平滑肌, 心髒, 肺, 脂肪組的風織, 肝
AAV6.2肺, 肝, 計務;内耳組織
AAV7平滑肌, 視網膜, 中樞神經(jīng)系統,&n算工bsp;肝
AAV8平滑肌, 中樞神經(jīng)那算系統, 視網膜, 内耳組織, 肝,&n技師bsp;胰腺, 心髒, 腎, 脂肪組織
AAV9平滑肌, 肺, 肝, 心髒筆厭, 胰腺, 中樞神經(jīng)系統, 腦，視錢南網膜, 内耳組織, 睾丸, 腎
AAV-rh10平滑肌, 肺, 肝訊雨, 心髒, 胰腺, 中樞神經國鄉(jīng)系統, 視網膜, 腎體信
AAV-DJ肝, 心髒, 腎, 脾
AAV-DJ/8肝, 腦, 脾
AAV-PHP.eB中樞神經(jīng)系統
AAV-PHP.S外周神經(jīng)系統
AAV2-retro脊神經(jīng)
AAV2-QuadYF内皮細胞
AAV2.7m8視網膜, 内耳組織
組織推薦使用的AAV血清型
平滑肌AAV1, AAV2, AAV3,行很 AAV5, AAV6, 文好;AAV7, AAV8, 喝匠;AAV9, AAV-rh10
中樞神經(jīng)系統AAV1, AAV2, AAV4, AAV5,你服 AAV7, AAV8,&nbs子了p;AAV9, AAV-rh10, AAV-PHP.eB妹影
外周神經(jīng)系統AAV-PHP.S
腦AAV1, AAV2, AAV5,&nbs冷林p;AAV7, AAV8, AAV9, AAV-DJ/8
視網膜AAV1, AAV2, AAV4, AAV5,&問從nbsp;AAV7, AAV8,&nb個快sp;AAV9, AAV-rh10, AAV2.7m8
内耳組織AAV1, AAV2, AAV6.2,電男 AAV8, 朋我AAV9, AAV2船飛.7m8
肺AAV1, AAV3, AAV4, AAV5快好, AAV6, AAV6.討行2, AAV9, AAV-rh1請拍0
肝AAV1, AAV2, AAV3, 黃報AAV6, AAV6.2, 購日AAV7, AAV8,&nbs聽要p;AAV9, AAV-rh10, AAV-DJ,&的信nbsp;AAV-DJ/8
胰腺AAV1, AAV2, AAV6錢間, AAV8, AAV9, AAV分廠-rh10
心髒AAV1, AAV4,&n動他bsp;AAV5, AAV6,窗開 AAV8, AAV算信9, AAV-rh10, AAV歌拿-DJ
腎AAV2, AAV4,&站呢nbsp;AAV8, AAV9, AAV-rh10話美, AAV-DJ,&n路制bsp;AAV-DJ/8
脂肪組織AAV6, AAV8, AAV9
睾丸AAV2, AAV9
脾AAV-DJ, AAV-DJ/8
脊神經(jīng)AAV2-retro
内皮細胞AAV2-QuadYF

注意：攜帶目的基因的轉移質粒上的ITR序列來自于AAV2音長。一般來說(shuō)，包裝不同血清型的AAV，指的是使腦來用不同血清型的衣殼蛋白表達質粒，短技與攜帶AAV2 ITR的轉移質粒進(jìn)行包裝上場。

查看不同腺相關病毒血清型病毒衣殼蛋白1（VP1）的氨基酸序列 司藍>>

交付内容
ssAAV
scAAV
昆蟲杆狀病毒生産AAV
非純化ssAAV制備服務純化ssAAV制備服務
交付内容

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，10x25 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，10x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1012GC/ml，10x100 ul

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒是中的規格對(duì)應贈送：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，100 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，2x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1011GC/ml，2x100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格看學對(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul

輔助病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，10x25 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，10x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1012GC/ml，10x100 ul

輔助病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應裡著選購：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul
病毒重懸液50 mM Tris-based緩沖液pH7.4 PBS-based緩沖液
運輸/存儲幹冰/-80°C，避免反複凍融幹冰/-80°C，避免反用見複凍融
推薦應用體外培養細胞轉導體外培養細胞轉導、動物體内細胞轉導

對(duì)照病毒

爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按吃長照“對(duì)照病毒與定制病毒的生物學(xué)應用相匹配”的原則給您贈送或西議者推薦對(duì)照病毒。例如，如果定制病毒表志道達一個基因，則推薦的對(duì)照病毒表達妹資熒光蛋白EGFP。如果定制病毒表達打線路靶某個基因的shRNA，則對(duì)照病毒知厭表達一個Scramble shRNA。推薦的對(duì)照病毒公國信息如下表所示：

對(duì)照病毒對(duì)照載體名稱對(duì)照載體ID定制病毒
EGFP對(duì)照AAV病毒pAAV[Exp]-CMV>EGFP:WPREVB010000-9394npt哺乳動物基因表達AAV病毒（包風廠含Tet-On誘導表達和FLEX條件性表達）、哺乳動物AAV C去不RISPR系統、哺乳動物非編碼RNA表達AAV病毒
mCherry對(duì)照AAV病毒pAAV[Exp]-CMV>mCherryVB900129-0800rvh綠你
Scramble shRNA對(duì)照站自AAV病毒，EGFP熒光pAAV[shRNA]-CMV>EGFP-U6>Scramb為短le_shRNAVB010000-0023jze哺乳動物shRNA幹擾AAV病毒
pAAV[shRNA]-CAG>EGFP-U6>朋對Scramble_shRNAVB010000-9489hhg
Scramble shRNA對(友光duì)照AAV病毒，mCherry熒光pAAV[shRNA]-CMV>mCherry-U6>Scramb劇醫le_shRNAVB010000-0024wah
Scramble miR30-shRNA對(duì)照AA數河V病毒，EGFP熒光pAAV[miR30]-CMV&g坐外t;EGFP:Scramble_m又他iR30-shRNA:WPREVB010000-9397wg東了w哺乳動物miR30-shRNA幹跳訊擾AAV病毒
Tet-On EGFP 對(duì)照AAV病毒（選購）pAAV[Tet_on]-TRE>民東;EGFP-CBh>tTS:T2A:r靜上tTAVB010000-0053bw音路h哺乳動物基因Tet-On誘導表達AA現麗V病毒
FLEX-EGFP對(duì)照AAV病毒（選購）pAAV[FLEX_on]-CMV>rev(EGF樂農P)VB180820-1044gcq哺乳動物基因FLEX條件性表達AAV病毒

輔助病毒

爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按照“輔科他助病毒與定制病毒的生物學(xué)應用相妹請匹配”的原則給您推薦輔助病毒。例如，如果定制病毒是一個隻含TRE啓動子的畫你TetOn慢病毒，則需要一個表達rtTA的輔助病毒，才能(子微néng)進(jìn)行誘導表達內請實驗。推薦的輔助病毒信息如下表所示：

輔助病毒輔助載體名稱輔助載體ID定制病毒
SaCas9 AAV病毒（選購）pAAV[Exp]-CMV>saCas9VB010000-9382per哺乳動物gRNA AAV病毒（不含Cas9）
Cre AAV病毒（選購）pAAV[Exp]-CMV>CreVB010000-9443kev哺乳動物基因FLEX條件性表達AAV病毒
非純化scAAV制備服務純化scAAV制備服務
交付内容

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，10x25 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，10x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1012GC/ml，10x100 ul

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應贈送件門：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，100 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，2x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1011GC/ml，2x100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì友冷)應選購：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul

輔助病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>2x1011GC/ml，10x25 ul
  • 中量制備：>2x1011GC/ml，10x100 ul
  • ⼤量制備：>2x1012GC/ml，10x100 ul

輔助病毒，按照定制病毒的規格對(du什通ì)應選購：

  • ⼩量制備：>1013GC/ml，4x25 ul
  • 中量制備：>1013GC/ml，10x50 ul
  • ⼤量制備：>1013GC/ml，10x100 ul
病毒重懸液50 mM Tris-based緩沖液pH7.4 PBS-based緩沖液
運輸/存儲幹冰/-80°C，避免反複凍融幹冰/-80°C，避免反複凍融商暗
推薦應用體外培養細胞轉導體外培養細胞轉導、動物體内細胞轉導

對(duì)照病毒

爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按照“對(duì)照病毒與錯火定制病毒的生物學(xué)應用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對(duì)錯通照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的對(duì)照病毒表湖店達熒光蛋白EGFP。如果定制病毒表達打靶某個基因的門東shRNA，則對(duì)照病毒表達一個Sc女為ramble shRNA。推薦的對(du話飛ì)照病毒信息如下表所示：

對(duì)照病毒對(duì)照載體名稱對(duì)照載體ID定制病毒
EGFP對(duì)照scAAV病毒pscAAV[Exp]-CMV>EGFP:WPREVB010000-9304aud子關哺乳動物基因表達scAAV病毒
Scramble shRNA對(duì)照師討scAAV病毒，EGFP熒光pscAAV[shRNA]-EGFP-U6>Scramble_shRNA大時VB010000-9343nhh哺乳動物shRNA幹擾scAAV病做輛毒
純化AAV制備服務（通過(guò)杆狀病毒轉導Sf9下她昆蟲細胞制備）
交付内容

定制病毒，按照規格交付：

  • ⼩量制備：>5x1013GC/ml，10x100 ul
  • 中量制備：>5x1013GC/ml，25x100 ul
  • ⼤量制備：>5x1013GC/ml，50 x 100 ul

對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：

  • ⼩量制備：>5x1013GC/ml，10x100 ul
  • 中量制備：>5x1013GC/ml，25x100 ul
  • ⼤量制備：>5x1013GC/ml，50 x 100 ul
病毒重懸液pH7.4 PBS-based緩沖液
運輸/存儲幹冰/-80°C，避免反複凍融
推薦應用體外培養細胞轉導、動物體内細胞轉導

對(duì)照病毒

爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，技些我們按照“對(duì)照病毒與定制病毒的生物兵地學(xué)應用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對(duì)照病毒。例愛關如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的對(duì)照病毒表達熒光蛋白E又不GFP。如果定制病毒表達打靶某個基因的shRNA又懂，則對(duì)照病毒表達一個Scra民花mble shRNA。推薦的對(duì)照病毒信息如下表所示：

對(duì)照病毒對(duì)照載體名稱對(duì)照載體ID定制病毒
超純化EGFP對(duì)照AAV病毒，杆狀病毒感染Sf9方法pBV-ITR-CMV>EGFP-ITRVB010000-9306ded哺乳動物基因表達AAV病毒（通過(秒國guò)杆狀病毒轉導Sf9昆蟲細胞制備）
運輸/儲存

我們的AAV病毒存儲在特殊的Tris緩機雪沖液或PBS緩沖液中，并采用幹冰運輸。收到AAV病毒後(hòu)，立即放歌開置于-80℃，可保存約一年。若放置家快于-20℃，則可保存2-3周。融解後(hò動男u)的AAV病毒可在4℃保存1-2周。雖是金然AAV病毒比其他多數病毒穩定（如慢病毒），但是也請避免反複凍銀計融，因爲這(zhè)會(huì)導緻中謝AAV病毒滴度顯著下降。

不同級别的AAV比較

下表比較了我們不同級别的AAV病毒。

科研級（非純化）科研級（超純化）科研級Plus
純化方式-CsCl梯度密度離心

CsCl梯度密度離心（默認）

碘克沙醇梯度密度離心（可選）

親和層析色譜（可選）

離子交換色譜（可選）

滴度> 1012 GC/ml> 1013 GC/ml1013 - 5x1013 GC/ml
純度（SDS-PAGE）-> 80%> 90%
内毒素水平< 30 EU/ml< 10 EU/ml< 2 EU/ml
完整衣殼比率-> 70%> 80%
生産/質控
三質粒轉染法生産AAV
昆蟲杆狀病毒生産AAV

我們通常使用三質粒系統包裝重組AAV病毒。該系統采草房用一個攜帶目的基因的轉移質粒、一個Rep-Cap表達質粒以及一個表達腺病毒基因可請（E2、E2A和VA）的輔助質粒供轉染HEK293頻生T包裝細胞。細胞短暫孵育後(hòu)，根據血清型的不但科同，收集上清或者細胞裂解液，PEG濃縮獲取病毒顆粒。對(d看也uì)于超純化AAV（體内應用級别畫市），再通過(guò)氯化铯（CsCl）密司媽度梯度離心對(duì)病毒顆粒進(jìn)一步純化和濃縮。

Typical workflow of tripel transfection-based AAV packaging and quality control.

圖1 三質粒法包裝AAV的典型流程

對(duì)于每一批我們生産的AAV病毒，我們的質可上量控制包括qPCR滴度檢測、微生物負荷檢測（針對(duì)細菌、真菌）、支原廠銀體檢測等。若轉移載體同時(shí)編碼一個熒光标記基因，我們還(市信hái)會(huì)將(jiāng做雜)病毒進(jìn)行細胞轉導以測定相應的熒光短火表達情況。此外，對(duì)于超純化AAV病毒，雪線我們還(hái)可以檢測内毒素水平和使用SDS-PAGE方音站法檢測病毒純度。

我們的使用杆狀病毒包裝AAV的工著化作流程包括兩(liǎng)個主要步驟，如圖1所示。步驟1中産生兩(liǎ朋要ng)種(zhǒng)重組杆狀病毒，第一個表達目的基因（GOI離道），其兩(liǎng)側有AAV反向(xiàng)末端重複序列 費子(Inverted terminal repeat，IT愛制R)，第二個則是輔助杆狀病毒表達AAV rep和cap腦我基因。在步驟2中，通過(guò)將(jiāng)步驟1産生的兩(l綠票iǎng)種(zhǒng)重組杆狀病毒共同感染昆蟲細科長胞來産生重組AAV顆粒。

爲産生兩(liǎng)種(zhǒng)重組杆狀病毒（一種(zhǒng)表件放達GOI，其兩(liǎng)側是AA水一V ITR；另一種(zhǒng很習)表達AAV rep/cap基因），首先需要將(jiāng樹線)每種(zhǒng)杆狀病毒的表達家麗盒克隆至杆狀病毒轉移載體中。然後(hòu)將(jiāng)杆狀病藍西毒轉移載體與表達Tn7轉座酶的輔助質粒共轉化玩討至含有杆狀病毒穿梭空載體（又名杆粒）的細菌宿火視主中，以産生重組杆粒。然後(hòu)將(jiāng)重組杆粒轉黑書染到昆蟲Sf9細胞中。經(jīng)過(guò)美購短暫的孵育期，從培養基中收集病毒顆粒并使用蔗糖梯度密度離心器金進(jìn)一步濃縮。我們采用qP離腦CR測定杆狀病毒滴度。然後(hòu)將(jiāng)兩(liǎng)種錢麗(zhǒng)重組杆狀病毒共感染昆蟲細胞中。在72-96高跳 小時(shí)的孵育期後(hòu)，從細胞裂請黃解液和上清液中收集AAV顆粒，并通過(gu如裡ò)PEG沉澱法進(jìn)行濃縮。對讀讀(duì)于超純化 AAV（體内應用級别討服），AAV病毒顆粒通過(guò)氯化铯 (CsCl)離筆 梯度超速離心進(jìn)一步純化和濃縮。我們使用q能藍PCR測定AAV滴度。

圖2 Baculovirus-AAV的典型生産女暗流程

對(duì)于每個我們生産的AAV，我們的QC包括qPCR報雨滴度測定（Titer measur電學ement）、微生物檢測（Bioburden test，針對(公能duì)細菌、真菌）、支原體檢筆玩測（Mycoplasma test）等。若轉移載體同時(shí如數)編碼一個熒光蛋白，我們還(hái)會(huì)將(jiāng)病毒現機進(jìn)行細胞轉導以測定相應的熒光表達情況（Transduction t術一est）。此外，對(duì)于超純化AAV病毒，我們還(hái)可以檢測就做内毒素水平（Endotoxin test）和使用SDS師不-PAGE方法檢測病毒純度（Virus purity test）。

下表展示了我們可提供的AAV QC方法。

其它可選購的QC服務方法
滴度檢測ddPCR
TCID50
AAV複制能(néng)力檢測qPCR
完整衣殼/空衣殼分析TEM
CDMS
SV-AUC
滴度保證

我們的滴度保證僅适用于包裝進(jìn)病毒的區域（從5’水年 ITR到3’ ITR）小于腺相關病毒承載限度（4.7 kb話房，～野生型AAV2基因組長(ch玩資áng)度）的載體。超過(guò)該範圍，超出4.秒妹7 kb的那部分序列在包入衣殼時(shí)會(huì)被(bè光花i)剪切掉，導緻包裝出來的AAV病毒顆粒含有不雨理完整的基因組，不僅影響ITR qPCR滴度檢測，而且影相火響轉基因表達。此外，對(duì她村)于如下情況，我們同樣(yàng)多都不能(néng)保證滴度：

  • AAV血清型3和4的滴度通常偏低。對(duì)于這(zhè)些血清型我們保跳銀證其滴度是其它血清型最小滴度的50%。
  • 包含對(duì)包裝過(guò)程有不利影光空響的序列，例如毒性基因（如促凋亡基因）；破壞包裝細胞或病行山毒的完整性（如導緻細胞聚集的膜蛋白）的基因 ；易于重排或者産生二級結構綠道的序列（如重複序列或者高GC含量序列）。
  • ⽤戶提供的載體，因爲我們無法控制載體質量。
客戶提供載體

如需客戶提供AAV病毒載體，則請按照外來物品接收指南將(jiāng)載體寄送給我們。請嚴格按照我們的指南來進(jìn)行中暗裝運以免造成(chéng)物品的身門任何延誤和損壞。客戶提供的所有材料均需經(jīng)能得過(guò)QC檢測，每一份材料附加檢測費用。請注意，子媽客戶提供物品接收并通過(guò)QC之後(hòu)生産弟北才正式開(kāi)始。

試驗驗證

三質粒轉染法生産的AAV

我們開(kāi)發(fā)了一系列專有技術用風通以優化三質粒轉染法包裝AAV的效率。我們的三質粒轉染法包裝的AAV在哺乳動煙校物細胞中表現出很高的轉導效率。

視頻

暫無

文檔

使用說(shuō)明書

腺相關病毒體外應用

腺相關病毒體内應用

基因治療專題

心髒研究專用AAV

神經(jīng)研究專用AAV請議

肝髒研究專用AAV

肌肉研究專用AAV

COA

常見問題解答

AAV病毒對(duì)比其它病毒載體有關鄉什麼(me)特點？▼

慢病毒MMLV腺病毒AAV
組織嗜性廣泛廣泛hAd5隻感染表達CAR受體的細胞取決于血清型
是否可感染非分裂細胞是否是是
病毒基因組穩定整合抑或遊離于宿主基因組穩定整合穩定整合遊離的DNA附加體形式遊離的DNA附加體形式
自定義啓動子是否是是
應用細胞培養和體内實驗細胞培養和體内實驗體内實驗體内實驗
體内免疫反應低低高非常低

AAV病毒滴度是如何測定的？ ▼

我們通過(guò)裂解AAV病毒顆粒，然後(hòu)以qP上刀CR測定裂解産物中的AAV基因組拷貝數（ITR區域的拷貝數為很）來獲取AAV的物理滴度（Ph姐哥ysical titer）。其他票信滴度測定方式如ddPCR、TC務老ID50以選購方式提供。

相關服務
設計載體 發(fā)送咨詢