杆狀病毒(Baculovirus)被(bèi)廣泛用于在昆蟲細胞中生産大量重爸綠組蛋白,因其具有以下優點:(1)适當的翻譯後(輛離hòu)修飾,因爲昆蟲細胞是高等真核生物;(2)病毒基因組比較大,約130 k雪車b,因此具有多個基因或大插入片段的高容量票務;(3)生物安全性高,因爲野生杆狀病毒不會(huì)感染人類;(4)強友呢啓動子Polyhedrin或p10驅動的蛋白産理河量非常高。我們開(kāi)發(fā)出一系列專有技術和試劑,從病區金毒滴度、純度、活性以及一緻性等方面(miàn)顯著提升了杆狀病毒包裝工藝水平。呢物
訂購信息
生産規格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格(CNY) | 周期 |
昆⾍杆狀病毒中量制備 | >106 PFU | >106 PFU/ml | 10x100 ul | ¥4,680.00 | 15-22天 |
昆⾍杆狀病毒⼤量制備 | >107 PFU | >107 PFU/ml | 10x100 ul | ¥7,780.00 | 22-29天 |
服務詳情
病毒類型
我們提供的昆蟲杆狀病毒類型爲AcMNPV毒株(Autograph鄉兵a californica multicapsid n司在ucleopolyhedrovirus)。
交付内容
| 杆狀病毒病毒制備服務 |
交付内容 | 定制病毒,按照規格交付: 中量制備:>106TU/ml,10x100 ul ⼤量制備:>107TU/ml,10x100 ul |
對(duì)照病毒,按照定制病毒的規格對(du會計ì)應贈送: 中量制備:>106TU/ml,2x100 ul ⼤量制備:>106TU/ml,2x100 ul |
Polybrene(5 mg/ml,200 ul),個來贈送 |
病毒重懸液 | DPBS緩沖液 |
運輸/存儲 | 幹冰/-80°C,避免反複凍融 |
推薦應用 | 昆蟲細胞轉導 |
對(duì)照病毒
爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗,我們按照“對(duì)照病毒與定制雜城病毒的生物學(xué)應用相匹配”的原則給您贈送或者頻黑推薦對(duì)照病毒。例如,如果定制病毒表達一個基因,則推薦的對(du慢年ì)照病毒表達熒光蛋白EGFP。推薦的對(du身什ì)照病毒信息如下表所示:
對(duì)照病毒 | 對(duì)照載體名稱 | 對(duì)照載體ID | 定制病毒 |
EGFP對(duì)照杆狀病毒 | pBV-EGFP | VB010000-9305vtu | 哺乳動物基因表達杆狀病毒 |
運輸/儲存
我們的杆狀病毒存儲在DPBS緩沖液中,并采用幹冰運輸。收到麗就病毒後(hòu),立即放置于-80℃,長(cháng)期貯存至少6個著村月。杆狀病毒放置于-20℃可保存一周。請避免反複凍融,因爲這(zhè)會(h不北uì)導緻病毒滴度大幅下降。
生産/質控
步驟 | 描述 | 時(shí)間 |
Transformation into E. coli cells技鄉 | 將(jiāng)攜帶目的基因(Gen飛上e of Interest, 簡稱GOI)和Tn7轉座位點的轉移化雜載體(Transfer vector)轉化到特定大話黃腸杆菌裡(lǐ),此菌株含有一個表達Tn7轉座酶的輔助質粒(help睡海er plasmid)和一個含有杆狀體花病毒基因組序列的大質粒(即bacmid,約136 kb,在杆狀關腦病毒序列中有Tn7轉座位點)。在該細菌裡(lǐ)費金,轉移載體上的目的基因轉座到bacmid上,形成(chéng)城可攜帶目的基因的重組bacmid。 | 第1天 |
Transfection into insect cells | 重組bacmid經(jīng)過(g可秒uò)檢測且序列無誤後(hòu),將(jiāng)工訊重組bacmid質粒DNA轉染昆蟲Sf9細胞。此時(shí)包說樂裝出來的爲粗制的杆狀病毒。 | 第4天 |
Virus amplification | 病毒擴增:使用粗制的杆狀病毒再次感染包裝細胞,從而擴大下月病毒産量。 | 第9天 |
Virus purification | 從培養上清中收集病毒顆粒。對(duì)于對我大規格包裝,采用蔗糖離心進(jìn)一步濃縮。 | 第14天 |
Quality Control | 我們采用基于qPCR的方法測定昆蟲杆什電狀病毒的滴度。 對(duì)于每一個我們生産的杆狀病毒,質量控制均包低公括滴度測定(Titer determin事我ation)、微生物(細菌和真菌)檢測(Bi員謝oburden test)、支原體檢測(Myco綠老plasma test)。若轉移載體同時(shí)編碼北議一個熒光蛋白,我們還(hái)會(huì)將(jiāng)病通藍毒進(jìn)行細胞轉導以測定相應的熒光表達情況(Transduction老麗 test)。 | 第15天及以後(hòu) |
交付周期
交付周期是指訂單接收到發(fā)貨之間的時(門了shí)間,不包括需要客戶提供任何物料(如病毒載體)的等待筆錯時(shí)間。
客戶提供載體
如需客戶提供杆狀病毒載體,則請按照外來物品接收指南將(jiāng)載體寄送給我們。請嚴格按照我們的指南來進(jìn)行裝運化問以免造成(chéng)物品的任何延誤和損壞慢務。客戶提供的所有材料均需經(jīng)過(guò)QC檢測,每一份材料附加檢爸學測費用。請注意,客戶提供物品接收并通過(guò)QC之後(hòu)知科生産才正式開(kāi)始。
視頻
暫無
文檔
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COA
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