腺病毒載體（Adenovirus）能(néng)夠攜帶大片段外源DNA、感村人染分裂細胞和非分裂細胞、誘導體液和細胞免疫應答（這(zhè)對(duì)于疫習大苗開(kāi)發(fā)是有益的）、表現出高效率的轉導和高水平的轉基因上筆表達、不整合細胞DNA（在細胞内保持dsDNA遊離體）。這(z通很hè)些特性使腺病毒作爲用于基因治療的轉基因載體、疫苗載體和溶瘤病毒療法中學筆使用的載體。我們開(kāi)發(fā)出一系列專有技術和試劑件友，從病毒滴度、純度、活性以及一緻性等方面(miàn)顯著提升了腺病毒包裝工藝低煙水平。
| 生産規格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格（CNY） | 周期 |
| 腺病毒⼩量制備 | >2.5x109 IFU | >1010 IFU/ml | 10x25 ul | ￥4,680.00 | 28-35天 |
| 腺病毒中量制備 | >1010 IFU | >1010 IFU/ml | 10x100 ul | ￥7,780.00 | |
| 腺病毒大量制備 | >1011 IFU | >1011 IFU/ml | 10x100 ul | ￥11,880.00 | |
| 超純化腺病毒中量制備 | >5x1011 VP | >1012 VP/ml | 10x50 ul | ￥14,680.00 | |
| 超純化腺病毒⼤量制備 | >1012 VP | >1012 VP/ml | 10x100 ul | ￥17,580.00 |
| 生産規格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格（CNY） | 周期 |
| 腺病毒⼩量制備 | >2.5x109 IFU | >1010 IFU/ml | 10x25 ul | ￥7,780.00 | 35-42天 |
| 腺病毒中量制備 | >1010 IFU | >1010 IFU/ml | 10x100 ul | ￥11,880.00 | |
| 腺病毒大量制備 | >1011 IFU | >1011 IFU/ml | 10x100 ul | ￥17,880.00 | |
| 超純化腺病毒中量制備 | >5x1011 VP | >1012 VP/ml | 10x50 ul | ￥22,080.00 | |
| 超純化腺病毒⼤量制備 | >1012 VP | >1012 VP/ml | 10x100 ul | ￥26,380.00 |
| 生産規格 | 應用 | 最小滴度 | 分裝 | 價格 (CNY) | 周期 |
|---|---|---|---|---|---|
| 超純化病毒大量制備 | 細胞培養和體内應用 | >1011 VP/ml | 10x100 ul | ¥ 34,980 | 44-62天 |
定制病毒，按照定制規格交付
對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購
我們提供第一代腺病毒（E1/E3-deleted Ad5）、嵌合型腺病毒（C少什himeric adenovirus）、以及Gutless腺病毒包什低裝服務。Ad5病毒的感染是通過(guò)病毒顆粒表面(m務能iàn)的纖突（Fiber）與細胞表面(miàn)受體CAR（C姐用oxsackie virus and adenovir黑門us receptor）特異性東雜結合而介導的。 并不是所有細胞都(dōu)高表達C可讀AR，Ad5病毒在某些不表達或者低表間身達CAR的細胞種(zhǒng)類上的應用受限。我們開(kāi)發(林看fā)了嵌合型腺病毒，它的感染是通過(guò)嵌合型纖突（Chimeri醫吃c fiber）與細胞表面(miàn)分子CD46特異性結合而介導的。林信
| 非純化腺病毒制備服務 | 純化腺病毒制備服務 | |
| 交付内容 | 定制病毒，按照規格交付：
| 定制病毒，按照規格交付：
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對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應贈送：
| 對(duì)照病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：
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輔助病毒，按照定制病毒的規格對(d妹行uì)應選購：
| 輔助病毒，按照定制病毒的規格對(duì)應選購：市水
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| 病毒重懸液 | HBSS緩沖液 | GTS緩沖液 |
| 運輸/存儲 | 幹冰/-80°C，避免反複拍都凍融 | 幹冰/-80°C，避免反複凍融 |
| 推薦應用 | 體外培養細胞轉導 | 動物體内細胞轉導 |
對(duì)照病毒
爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗金間，我們按照“對(duì)照病毒與樹光定制病毒的生物學(xué)應用玩新相匹配”的原則給您贈送或者推薦對(duì)照病毒。例如，如果定制病毒表達頻用一個基因，則推薦的對(duì)照病毒表達熒光蛋媽商白EGFP。如果定制病毒表達打靶某個基因的shRNA，則對(duì信門)照病毒表達一個Scramble從兒 shRNA。推薦的對(duì)照病毒信息如下一車表所示：
| 對(duì)照病毒 | 對(duì)照載體名稱 | 對(duì)照載體ID | 定制病毒 |
| EGFP對(duì)照腺病毒，CMV啓動子 | pAV[Exp]-CMV>EGFP | VB010000-9299hac | 哺乳動物基因表達腺病毒（包含FLEX條件性表達）、哺乳動物腺病毒CRISPR市票系統、哺乳動物非編碼RNA表達腺病毒 |
| EGFP對(duì)照腺病毒，EF1A啓動子（選購） | pAV[Exp]-EF1A>EGFP | VB900088-2235wrm | |
| mCherry對(duì)照腺病毒，CMV啓北動動子（選購） | pAV[Exp]-CMV>mCherry | VB010000-9300kfr | |
| mCherry對(duì)照腺病毒，EF好大1A啓動子（選購） | pAV[Exp]-EF1A>mCherry | VB010000-9408agb | |
| Scramble shRNA對(duì)照腺病毒，E技子GFP熒光 | pAV[shRNA]-EGFP-U6>Scramble_shRNA | VB010000-0020ytx | 哺乳動物shRNA幹擾腺病毒 |
| Scramble shRNA對(duì)照腺病毒，mCherry熒光 | pAV[shRNA]-CMV>mCh呢光erry-U6>Scramble_sh離資RNA | VB010000-0021kwc | |
| Scramble miR30-shRNA對(duì)照腺病毒，EGFP熒光 | pAV[miR30]-CMV>個自;EGFP:Scramble_miR30-shRNA:WPRE | VB010000-9350dnk | 哺乳動物miR30-shRNA幹擾腺病毒 |
| FLEX-EGFP對(duì)照腺病毒（選購） | pAV[FLEX_on]-CMV>rev(EGFP) | VB010000-9327vmy | 哺乳動物基因FLEX條件性表達腺病毒 |
輔助病毒
爲了更好(hǎo)地開(kāi)展您的實驗，我們按照“輔助病毒與定制病毒的生術身物學(xué)應用相匹配”的原則給您推薦輔助病毒。例如，如果定制化的病司個毒是一個gRNA腺病毒（隻表達gRNA），則需要煙村一個表達Cas9的輔助病毒，才能木雨(néng)進(jìn)行CRISPR編輯實驗。推薦的輔助病毒信息如下表所示：朋喝
| 輔助病毒 | 輔助載體名稱 | 輔助載體ID | 定制病毒 |
| Cas9 腺病毒（選購） | pAV[Exp]-CMV>h這關Cas9 | VB010000-9381pwj | 哺乳動物gRNA 腺病毒（不含Cas9） |
| Cre腺病毒（選購） | pAV[Exp]-CMV>Cre | VB010000-9374azh | 哺乳動物基因FLEX條件性表達腺司黑病毒 |
我們的非純化腺病毒存儲于HBSS緩沖液，純化腺病毒存儲于GTS緩沖液中，并答雨采用幹冰運輸。收到腺病毒後(hòu)，立即放置于-80°C，可保存約北哥一年。若放置于-20°C，則可保存2-3周。融解後(h票文òu)的腺病毒可在4°C保存1-2周。雖然腺病毒比其他多數病毒穩定來計（如慢病毒），但是也請避免反複去歌凍融，因爲這(zhè)會(huì)導緻腺病毒滴度顯著下降。
| 步驟 | 描述 | 時(shí)間 |
Plasmid linearizat刀理ion and Transfection | 我們常規使用的第一代腺病毒包裝系統包見兒括1個含有缺失了E1/E3基因的腺病毒基因組序列的轉西動移質粒（Transfer plasmid）和1個表達E1基因的包裝購還細胞（adenoviral E1-expressing慢對 cell line），其包裝流程是通過(guò)内切酶PacI將微了(jiāng)攜帶目的基因（Gene of Interest，簡稱跳街GOI）的轉移質粒線性化。線性化的質粒DNA随後(hòu)轉染到包裝細動相胞中，E1基因的表達産物激活轉移質粒上的腺病毒基因的表達（E3基因的缺失不影響可嗎腺病毒的包裝），産生重組腺病毒顆粒。做數此時(shí)生産出來的爲粗制的腺病毒。 | 第1-6天 |
Virus amplificati術自on | 粗制的腺病毒再次轉導到在包裝細胞中進(jìn)行擴增。風他 | 第7天 |
Concentration and p現如urification | 對(duì)于非純化的腺病毒，腺病毒可以被(bèi)細胞直接分泌到培養船嗎基中，然後(hòu)進(jìn)行收集。對(duì)于超純化腺病毒，則還(場相hái)需要進(jìn)一步的氯化铯（CsCl）密度多但梯度離心進(jìn)一步純化和濃縮。 | 第24天 |
Quality Control | 對(duì)于每一個我們生産的腺病毒，質量控制均包括基于免疫細胞什煙化學(xué)染色（ICC）的滴鐵她度測定（Titer determinat們動ion）、微生物（細菌和真菌）檢測（Bioburden test金煙）和支原體檢測（Mycoplasma test）。 若轉移載體同時(shí)編碼一個熒光蛋白，我們還(há相年i)會(huì)將(jiāng)病毒進(j哥雨ìn)行細胞轉導以測定相應的熒光表達情況（Trans森技duction test）。此外，對(duì)于這在超純化腺病毒，我們還(hái)可以檢測内毒素水平（Endoto校服xin test）。 | 第28天及以後(hòu) |
我們的滴度保證僅适用于包裝進(jìn)懂村病毒的區域（從5’ ITR 到3’ ITR）小于腺病毒承載限也近度（38.7 kb，~野生型HAd5基因組技道長(cháng)度36 kb的108%）的載體。超過(guò)該範圍，超出的那得說部分序列在包入衣殼時(shí)會(h通少uì)被(bèi)剪切掉，導緻包裝出來的腺病毒顆農做粒含有不完整的genome。此林用外，對(duì)于如下載體，我們同樣(yàng)不能(néng)保證滴度志會:
如需客戶提供慢病毒載體，則請按照外來物品接收指南將(jiāng)載體寄送給我們。請嚴格按照我們的舞工指南來進(jìn)行裝運以免造成(chéng)物品的任何延誤和損跳河壞。客戶提供的所有材料均需經(jīng)過(guò)QC檢測，每一份讀民材料附加檢測費用。請注意，客戶提水飛供物品接收并通過(guò)QC之後(hò冷也u)生産才正式開(kāi)始。
周期是指訂單接受到發(fā)貨之個理間的時(shí)間。不包括需要客戶提供任慢來何物料（如病毒載體）的等待時(shí)間。
暫無
使用說(shuō)明書
| 慢病毒 | MMLV | 腺病毒 | AAV | |
| 組織嗜性 | 廣泛 | 廣泛 | hAd5隻感染表達CAR受體的細胞 | 取決于血清型 |
| 是否可感染非分裂細胞 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 病毒基因組穩定整合抑或遊離于宿主基因組 | 穩定整合 | 穩定整合 | 遊離的DNA附加體形式 | 遊離的DNA附加體形式 |
| 自定義啓動子 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 應用 | 細胞培養和體内實驗 | 細胞培養和體内實驗 | 體内實驗 | 體内實驗 |
| 體内免疫反應 | 低 | 低 | 高 | 非常低 |
對(duì)于腺病毒，我們測量的是功效滴吧化度（Functional titer）。在293A城熱細胞中轉導梯度稀釋的腺病毒後(hòu)，我議靜們使用我們采用基于免疫化學(xué)的方法對(duì)轉導上體成(chéng)功的細胞進(j窗關ìn)行計數來代表病毒滴度。這(zhè)些細胞包含了腺病毒特異性六連體蛋白（線化Ad5 hexon protein），并且每個細胞被(bèi)看作一個感染動影單位。細胞在非常低的感染複數的條件下被(bèi間費)轉導，以保證每個細胞隻被(bèi)一個工雪腺病毒感染。這(zhè)種(zhǒng)實驗熱你方法與傳統的噬菌斑試驗有良好(hǎo)的相書上關性。對(duì)于超純化的腺病毒，我們通過(guò)測紙購定病毒顆粒的光密度（OD260）來換算爲滴度（坐車光密度與病毒的功效滴度有良好(hǎo)的相關性）。
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