如何在VectorBuilde冷數r上設計載體?
您可以通過(guò)兩(liǎn門金g)種(zhǒng)途徑來獲得定制載體。其一,利用我們簡單直觀的Vec好音torBuilder在線載體設東工計平台,自行設計載體。您隻需點擊主頁子現菜單上的“設計我的載體”,根據提示一步步操作即可。通過(guò)點擊鼠标,幾分鍾内您幾乎可以設計出民土任何您想要的載體(如常規載體,慢病毒載體、腺病毒載體,過拿算(guò)表達、幹擾載體等)。其二,若您無法設計出您所需要的載體,則用村可以點擊主頁菜單上的“發(fā)送設計咨詢”,將(jiāng)您的設計需畫笑求發(fā)送給我們,我們將(jiāng)爲您免費設計載體。制我詳細的設計流程請參考以下信息:
在VectorBuilder上自行們化設計載體
步驟1:
在VectorBuilder主頁上,點擊“設計我的載體”,進(jìn)入“選擇載體系統”頁面(miàn)。在這(zhè)個頁面(miàn)上羅列了所有可供選道看擇的載體系統,選擇您需要的載體類型後(hò話我u),點擊旁邊的“現在去設計”按鈕即可。例如,如果您要設計一個在哺乳動物細胞中表土呢達目的基因的慢病毒載體,則點擊“哺乳動物基因表達載體”—“慢病毒”—“現在去設計”。
詳細的載體系統技術信息可查看“載體系統指南”。
步驟2:
當您選擇一個載體系統後(hòu銀厭),您將(jiāng)進(jìn)入到“載體設計頁面(miàn)”。在這(zhè)裡(lǐ),您將(jiāng)她城看到可選擇元件的載體圖譜。圖譜上标記做北了兩(liǎng)種(zhǒng)類型的體輛元件,其中一部分是固定的載體骨架,一部分由您自由添加,例如基因表達的啓動子、O哥河RF或其他元件(如藥物篩選标記或熒光報告基因),您按謝光順序輸入添加即可。當在載體上添加一個元件時(shí),您可以選擇Ve刀站ctorBuilder的元件數據庫光嗎,也可以自己輸入序列。當添加ORF時(shí對答),您可以選擇插入蛋白标簽或引入突變。以下是使用小提示:
如何從數據庫中選擇元件:我們含有兩(liǎng)種(zhǒng)類型的元件數據庫。要黑一類是羅列在網頁上的常用元件庫(例如常用了遠的啓動子CMV、EF1A、CAG等),另一類是基錯照于基因的數據庫(例如ORF、shRNA和gRNA),您可以通過(guò)檢索基嗎窗因名和物種(zhǒng)來獲得請很您感興趣的基因元件。例如,當您要設計一個表達鐵要人類BMP2基因的慢病毒載體時(shí),在“插入ORF”的步驟中點擊“選擇ORF數據庫”并搜索人類BMP2,搜索結果會(huì)列出這(zhè)個基因所有的RedS影一eq轉錄本,其中有一個是Vect制都orBuilder推薦的。您可以選擇任一轉錄雨能本的ORF序列添加到您的載體中舞明,也可以編輯後(hòu)再添加(如插入表位标簽或引站亮入突變等)。
詳細的載體元件信息可查看“載體元件指南”。
如何使用ORF編輯功能(néng):您可以在開(kāi)放閱讀框内插入表哥物位标簽或引入突變,也可以添加到載體之後(hòu)再做修改。您隻需要在載體圖譜上著火點擊已插入ORF,選擇下拉菜單西暗中的“編輯ORF”,就(jiù)可以打開(kāi)序列編也妹輯窗口并進(jìn)行修改操作。點擊序可章列下面(miàn)的“添加标簽”按鈕,您將(jiāng)看到一系列常用的标簽。您可以劇不將(jiāng)它們添加在開(kāi)放閱讀框的N端或民機C端,您也可以輸入或删除核苷酸直接編輯序列。當您要編輯子姐VectorBuilder數據庫中自帶的元件時(shí),所有的編城和輯曆史都(dōu)會(huì)被(bèi算分)記錄。在序列編輯窗口,您還(hái)可以使用其他便捷的功能(néng),例些得如翻譯,查找開(kāi)放閱讀框,查看暗書反向(xiàng)互補鏈等。
如何將(jiāng)多個ORF置有個于同一個啓動子下遊:當您設計一個基因表達載體時(s時的hí),您最多可以在同一個啓動子下遊放置4個ORF作爲多順反子表達框。您可唱通以使用融合蛋白,也可以使用2A肽或IRES連接子。您可以通過(guò)點金東擊“載體設計頁面(miàn)”左上角的“選擇插入基因的個數”來設置位于同一個啓動子下遊的ORF個數。
步驟3:
當您完成(chéng)載體設計後(hòu),點擊“完成(chéng)設計”按鈕進(jìn)入“載體信息”頁面(miàn)。在這(zhè)裡(lǐ),您能(néng)看到完整的載體工從注釋圖譜和載體序列。您也可以將(jiāng)它來報加入到您的購物車中、保存到您的賬戶中或者將(jiāng)載體信息分但媽享給您的同事(shì)。您還(hái)可以下載PDF格式的載體報黃裡告和導出GenBank格式的序列文件。
發(fā)送設計咨詢
您在使用VectorBuilder設計載體時(shí技厭)可能(néng)會(huì)遇到一好服些問題(如您所需的載體骨架在VectorBuilder平台上不電麗适用),這(zhè)時(shí)候您隻需要在Vect道光orBuilder的主頁上點擊“發(fā)送設計咨詢”,把您的需求發(fā)送給我們即可。我們的技術人員將(jiāng)爲您免女間費設計,并將(jiāng)設計好(hǎo)的方案、裡紙價格和周期等所有您想要了解的信息一起(qǐ)發(fā)送給您。