雲舟生物可爲您構建具有極小的背景表達且高水平有的誘導目的基因表達的Tet誘導基因表達細胞穩轉株。歌科此外，我們可以設計表達Tet調控快跳蛋白（如 rtTA、tTS/rtTA、不什tet3G 等）的細胞穩轉株。用攜帶TRE啓動子驅動匠來的GOI的病毒/質粒轉導/轉染這(zhè)些細胞，可以靈活快公進(jìn)行實驗設計并可靠地 實現Tet誘導基因表達。對(duì)于T行音et-On細胞穩轉株，其目的基因的誘導靜習表達效果經(jīng)過(guò)RT-q地術PCR 進(jìn)行驗證。每批細胞産品放行前，我們還(hái)會(huì)數用開(kāi)展一系列QC試驗，比如無菌測試、支原體檢測等。
亮點：
圖1 Tet誘導基因表達細胞穩轉株的構建流飛音程。
| 服務 | 交付内容 | 價格(CNY) | 周期 |
|---|---|---|---|
| Tet誘導基因表達細胞穩轉株構建 | 多克隆細胞群（>106個細胞/管，2管） | ￥18,980起(qǐ) | 9-15周 |
| 單克隆細胞株（>106個細胞/管，每個克隆各2管） | ￥23,980起(qǐ) | 9-15周 |
* 增加交付單克隆數將(jiāng)收取額外費用。
| 試驗項目 | 方法 |
| Tet誘導基因表達驗證（默認） | RT-qPCR |
| 表達測試（額外收費） | WB、IF、FACS |
| 無菌測試（默認） | PCR檢測支原體、生物負荷檢測等 |
圖2 在293T細胞中使用Tet系統誘導表達EGFP。TRE啓動子驅動表達EGFP能話的慢病毒轉導穩定表達tTS/r森校tTA的293T細胞，MOI=1。針對(duì)有你好添加四環素（Dox+）和不添加四環素（林為Dox-）的EGFP表達效果進(j男話ìn)行檢測：（A）熒光顯微鏡觀察。（生街B）流式細胞術檢測。（C）轉導後(hòu)24 h和48 h進(jìn)話木行western blot。MFI：熒光強度中值。
四環素（Tet）誘導基因表達系統是控制哺乳動鐘藍物細胞基因表達的有力工具。我們的Tet-On的美載體系統在沒(méi)有四環素的情況下可實現GOI幾乎完全草花沉默，而在添加四環素時(shí)GOI快速且高水平表達。該系統校木包含多個組分， 其中tTS蛋白在無四環素的情況下主章相動沉默GOI，rtTA蛋白在四環素存答們在的情況下強烈激活GOI表達。北化在沒(méi)有四環素的情況下，TetR（Tet阻遏蛋還都白）和KRAB-AB（Kid-1蛋白的轉錄阻遏結構域）融合産生的tT船用S蛋白與TRE啓動子結合，主動抑制基因轉錄。另一方面(miàn)市窗，rtTA 蛋白是一種(zhǒng謝離) rTetR（一種(zhǒng)突變型 Tet 阻遏蛋白）和 VP16（用學單純疱疹病毒蛋白16的轉錄激活子結構域）的融合蛋白，僅在四環素存在的情況要電下與 TRE 啓動子結合以激活基因轉錄。我們的Tet-Off草討載體系統在四環素存在的情況下可通過(guò)tT兒民A蛋白與TRE啓動子的結合來抑制靶基因表達。
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