hSpCas9 IVT mRNA

我們可制備無核苷修飾或N1-甲基假尿苷（m1Ψ）修飾的hSpCas9生厭 mRNA。我們的hSpCas9 IVT mRNA經(jī你中ng)過(guò)試驗驗證，在體外細胞中可以高水平表達hSpCas些商9。

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試驗驗證

IVT cas9 validation.jpg

hSpCa9 IVT mRNA在體外的基因編輯效果

（A）向(xiàng)表達EGFP的HEK293T細胞轉染打靶RGF費暗P的gRNA以及經(jīng)過(g空你uò)N1-甲基假尿苷（m1Ψ）修飾的hSpCas9 放討IVT mRNA。（B）通過(guò)顯微鏡（100X）觀察無轉染的兒現（NC）以及轉染的兩(liǎng)組細胞。（C）煙能流式細胞術定量檢測熒光強度。（D）轉染時電後(hòu)48或72 h，轉染後(hòu)的細胞相對(duì)船報NC減少了約40%的EGFP表達量。（E和F）基因編輯效照是果通過(guò)T7E1酶切（E）和Sanger測序确認（F）。高亮表示的志來腺嘌呤表明了在靶序列的插入突變。